• 造模机制：

  Trimethylamine N-oxide dihydrate（TMAO・2H₂O，活性成分 TMAO）通过以下机制诱导急性心肌功能改变：① 直接增强心肌细胞 L - 型钙通道开放概率，促进钙内流及钙诱导钙释放，升高胞内钙浓度（Fluo-4 荧光强度升高 2.2-2.7 倍）；② 启动钙调蛋白依赖性蛋白激酶 Ⅱ（CaMKⅡ），磷酸化肌浆网钙 ATP 酶（SERCA）抑制蛋白磷蛋白，加速钙再摄取，同时提升心肌收缩速率与舒张速率；③ 模拟慢性肾病（CKD）时 TMAO 蓄积的病理状态，引发心肌正性变力与变时效应，为研究尿毒症性心肌病的急性病理进程提供模型。

• 相关产品：

  Trimethylamine N-oxide dihydrate (T5247)

• 造模方法：

  实验对象：

  小鼠, CD-1, 雄性, 12 周龄, 体重 25-30g

  给药剂量和方式：

  ① 核心造模（离体心脏法）：
  - Langendorff 灌注系统：主动脉逆行灌注, Trimethylamine N-oxide, 终浓度 3-300 μM, 溶于含氧 Ringer 液（pH7.4）, 灌注 20 分钟后检测；
  - 器官浴法：分离小鼠心室肌条，悬挂于含 95% O₂+5% CO₂的 Ringer 液中，加入 Trimethylamine N-oxide（300 μM、3 mM），30 分钟后电刺激（1 Hz，5 ms，40 V）检测收缩功能；
  ② 对照处理：对照组给予等体积无 TMAO 的 Ringer 液，另设 d - 甘露醇（300 μM、3 mM）渗透压对照；

  给药频率和周期：

  单剂量

• 模型验证：

  1. 功能指标： - 心肌收缩力：小鼠心肌条等长张力升高 20%-41%，人体心肌组织张力升高 29%（p<0.05）； - 收缩 / 舒张速率：最大斜率升高 22%-55%，最小斜率升高 27%-43%（p<0.05）； - 胞内钙浓度：多光子显微镜下 Fluo-4 AM 荧光强度较对照组升高 2.2 倍（300 μM）、2.7 倍（3 mM）（p<0.05）； 2. 分子指标： - 钙信号通路：CaMKⅡ 磷酸化水平升高，SERCA 活性增强（Western blot 检测）； 3. 特异性验证： - TMAO 前体 TMA（3-300 μM）无收缩增强效应，排除前体干扰； - 甘露醇对照组无功能改变，排除渗透压影响。

*注意事项：小鼠麻醉采用 3% 异氟烷吸入，快速取心后置于 4℃冰 Ringer 液中，避免心肌缺血损伤

*参考文献：Oakley CI,et,al. Trimethylamine-N-oxide acutely increases cardiac muscle contractility. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2020 May 1;318(5):H1272-H1282.