慢病毒包装服务

慢病毒的结构

慢病毒直径为 80-120nm，呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒最外层是包膜(包膜蛋白决定了感染细胞的类型)，再往里依次为基质蛋白和衣壳，最里面是两条相同的正股 RNA 链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。下图是慢病毒的结构示意图[1]：

慢病毒感染细胞的过程

慢病毒感染细胞的第一步是通过包膜蛋白与细胞表面受体结合。慢病毒与宿主细胞膜融合后释放结构蛋白、酶蛋白和病毒核心。病毒RNA 在逆转录酶的作用下逆转录并与整合酶形成整合前复合物。整合前复合物进入细胞核后，整合酶催化其整合至宿主基因组。外源基因前启动子驱动其在细胞质中表达。右图是慢病毒感染细胞的示意图[2]：

慢病毒感染细胞的过程

慢病毒载体是一类重组逆转录病毒载体，可广泛应用于基因治疗和细胞分 子生物学研究领域，主要特点如左图所示：

慢病毒包装服务流程

陶术生物采用自失活（SIN）慢病毒系统，提供从载体设计到病毒包装与纯化的一站式服务，为用户的基因与细胞治疗研究赋能。陶术生物凭借先进的悬浮无血清培养工艺和优化载体 GLV3 ，可承诺交付滴度≥ 10⁸TU/mL 的慢病毒，确保高效细胞感染。服务流程如下图所示：

慢病毒包装服务质量控制

陶术生物对于慢病毒的生产和质控遵循国际公认的标准流程，采用三质粒或四质粒系统在 HEK293T 细胞中进行包装，所获得的病毒颗粒经过纯化，并通过qPCR 对病毒基因拷贝进行滴度测定。陶术生物最终交付给用户的慢病毒滴度≥10⁸TU/mL 且无支原体、内毒素等污染，可以满足各种科研实验的使用要求。（注：对慢病毒包装过程有不利影响的序列，无法保证滴度＞1E+8TU/mL）陶术生物对于慢病毒包装服务的质量控制如右表所示：

陶术生物依托于成熟稳定的慢病毒包装平台和严格的生产质控，可以提供从慢病毒质粒设计、构建、病毒包装、细胞系建立至基因表达分析在内的多种定制服务项目。具体的服务优势如下图所示：

引用文献

[[1] Pamenter G, Davies L, Lamont C, Rahim D, Knevelman C, Miskin J, Mitrophanous K, Dikicioglu D,Bracewell DG. Lentiviral vector determinants of anion-exchange chromatography elution heterogeneity. Biotechnol Bioeng. 2024 Sep;121(9):2936-2951. doi: 10.1002/bit.28766. Epub 2024 Jun 14. PMID: 38874319.

[2] Sun F, Chen H, Dai X, Hou Y, Li J, Zhang Y, Huang L, Guo B, Yang D. Liposome-lentivirus for miRNA therapy with molecular mechanism study. J Nanobiotechnology. 2024 Jun 10;22(1):329. doi:10.1186/s12951-024-02534-0. PMID: 38858736; PMCID: PMC11165871.