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腺相关病毒包装服务

腺相关病毒属于细小病毒科属,是目前发现的一类结构简单、无包膜的单链 DNA 缺陷型病毒

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腺相关病毒包装服务核心信息
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质检全面
可按需选择电镜、HPLC、支原体、rcAAV、等多个检测项
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经验丰富
10多年专业AAV生产经验,成功交付多个批次AAV病毒
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交付周期短
常规定制需求可在6个工作日交付
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品质可靠
为用户交付高滴度和高纯度的产品

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腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)属于细小病毒科(Parvoviridae),Dependoparvovirus 属,是目前发现的一类结构简单、无包膜的单链 DNA 缺陷型病毒。腺相关病毒基因组包含两端的反向末端重复序列(inverted terminal repeats,ITRs)、转录调控区启动子(P5、P19、P40)和两个分别编码 Rep 和 Cap 蛋白的开放阅读框,全长 4.7 kb。


科学研究中采用的重组腺相关病毒载体(recombinationadeno-associated virus, rAAV)是在非致病的野生型 AAV 基础上改造而成的基因载体,用于向细胞中递送遗传物质。由于腺相关病毒具有宿主范围广、安全性高、免疫原性低、表达稳定和物理性质稳定等优点,使得腺相关病毒可以广泛地应用于基础研究和临床试验中,成为基因治疗研究中备受青睐的病毒载体。

腺相关病毒包装服务介绍

腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)的结构

腺相关病毒的直径在20-26nm范围内,其直径为腺病毒的1/5,慢病毒的 1/4,呈现 20 面体结构,对分裂细胞和非分裂细胞均可感染。冷冻电镜重构的腺相关病毒的结构图如右图所示[1]:

(A) 经运动校正后的图像,由多帧整合而成;(B) 基于 75,316 个颗粒计算得到的二维分类平均图;(C) 金标准 FSC 曲线[2]估算分辨率为 1.56 Å;(D) 重构结果,根据到颗粒中心的距离以彩虹色标显示。视角沿二重对称轴,可在中心左右两侧看到各三重轴周围的突起,在中心上下两侧看到五重轴孔道;

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腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)基因组

腺相关病毒是一种单链 DNA 病毒,含有约 4.7kb 的单链线性 DNA 基因组,其基因组由rep基因和cap基因组成,其两侧分别有两个反向末端重复序列(ITRs)。ITRs 对于病毒的复制和包装具有重要作用;rep 基因编码单个开放阅读框(ORF),有助于 AAV 基因组的复制和病毒颗粒的组装;Cap 蛋白为病毒衣壳蛋白,衣壳组装所必需的装配激活蛋白(AAP)是由 cap 基因内移框的 ORF 所编码。衣壳包含三种类型的亚基 VP1、VP2 和 VP3,比例为 1:1:10(VP1:VP2:VP3)。

基于 AAV 的基因组结构,基因工程化的 AAV 载体删除了全部 AAV 蛋白编码序列,添加了外源基因的表达盒。唯一的病毒来源序列是 ITR,它们是在病毒包装过程中指导 AAV 复制和包装所必需的。病毒编码序列的完全去除使 AAV 的包装能力最大化,并且有助于它们在体内递送时的低免疫原性和细胞毒性。腺相关病毒的基因组示意图如右图所示[3]:

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腺相关病毒转染细胞的途径

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腺相关病毒通过结合细胞表面的主要受体和辅助受体来感染靶细胞,从而触发细胞的内吞作用进入细胞。进入细胞后,AAV 病毒颗粒释放并聚集在细胞核周区域,当病毒进入细胞核,AAV 病毒颗粒会释放它们的单链基因组,该基因组被转化为双链 DNA,进而介导病毒基因的转录和翻译。

AAV 的 ITRs 是重组AAV 扩增所必需的,该序列可以诱导基因表达,并在载体生产和确保病毒在细胞的转导中发挥关键作用。目前在 AAV 基因组中有 96%基因可以被删除或替换,扩大了工程化 AAV 用于基因治疗的灵活性。

到目前为止,至少有 12 种天然 AAV血清型和 100 多种工程化的 AAV 变异体被开发作为基因递送工具,并从这些载体中不断衍生出更多的 AAV 突变体,以优化 AAV 在基因治疗中的作用。左图是AAV 病毒转染细胞的示意图[4]:

腺相关病毒转染细胞的特点及优势

  • 安全性高:AAV不参与任何疾病的发生,已经用于临床疾病的治疗
  • 应用范围广:可感染分裂及非分裂细胞,覆盖多种组织类型,应用范围广
  • 免疫原性低:体内注射后几乎不会引发强烈免疫反应,不会被机体快速清除,病毒留存率高,实验重复性好
  • 表达周期久:AAV免疫原性低,基因可持续表达半年以上
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腺相关病毒(AAV)包装流程


陶术生物可以提供从腺相关病毒(AAV)质粒设计、构建、包装至表达分析的全套服务。不仅如此,还可以提供全面的腺相关病毒(AAV)载体和表达系统,用于体内和体外表达 human/mouse/rat ORFs,lncRNA、circRNA、shRNAs 和CRISPR/gRNA。下图展示了腺相关病毒(AAV)的包装流程:

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腺相关病毒(AAV)包装服务流程

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引用文献
  • [1] Xie Q, Yoshioka CK, Chapman MS. Adeno-Associated Virus (AAV-DJ)-Cryo-EM Structure at 1.56 Å Resolution. Viruses. 2020 Oct 20;12(10):1194. doi:10.3390/v12101194. PMID: 33092282; PMCID: PMC7589773.
  • [2] Scheres, S.H. Relion: Implementation of a Bayesian approach to cryo-EM structuredetermination.J. Struct. Biol. 2012, 180, 519-530. [CrossRef] [PubMed].
  • [3] Xia K, Liu S, Wu Z, Jiang JH. Research Status and Applications of Adeno-Associated Virus. Chembiochem. 2025 Apr 1;26(7):e202400856. doi: 10.1002/cbic.202400856. Epub 2025 Jan 9. PMID: 39724465.
  • [4] Li C, Samulski RJ. Engineering adeno-associated virus vectors for gene therapy. Nat Rev Genet. 2020 Apr;21(4):255-272. doi: 10.1038/s41576-019-0205-4. Epub 2020 Feb 10.PMID: 32042148.