Acriflavine (Acriflavinium chloride 3,6-Acridinediamine mix) is a papain-like protease (PL(pro)) inhibitor, a fluorescent dye for labeling high molecular weight RNAs, has antimicrobial and anticancer activity, inhibits SARS-CoV-2 and other β-coronaviruses, and can be used for research on leukemia. be used to study leukemia.

一、 RNA标记
实验步骤：
1. 制备溶液：将Acriflavine溶解在适当的溶剂中，如DMSO或水，浓度根据实验需要调整。
2. 标记RNA：将溶液(10-100uM)加入到RNA样品中，孵育一定时间（通常为30分钟至1小时）。
3. 荧光测量：使用荧光分光光度计或荧光显微镜检测RNA的荧光信号，评估标记效率。
二、 抗菌实验
实验步骤：
1. 溶解Acriflavine：在适当的溶剂中溶解Acriflavine（通常在PBS或水中）。
2.处理细菌：将不同浓度的Acriflavine溶液与待测试的细菌接触，孵育一定时间。
3. 检测抑制效果：通过细菌生长曲线或平板计数方法测量抑菌效果。
三、 抗癌研究
实验步骤：
1. 溶解Acriflavine：将Acriflavine溶解于适当的溶剂中（如DMSO）。
2.处理肿瘤细胞：将不同浓度的Acriflavine溶液添加至培养的肿瘤细胞中，孵育一定时间。
3.细胞增殖检测：使用MTT法、克隆形成实验或其他细胞增殖检测方法，评估Acriflavine的抗癌活性。
四、 SARS-CoV-2抑制实验
实验步骤：
1.溶解Acriflavine：在适当溶剂中制备Acriflavine溶液。
2.与病毒接触：将Acriflavine溶液加入病毒培养体系中，并在不同浓度下与SARS-CoV-2接触。
3. 病毒抑制检测：通过RT-PCR、病毒滴度实验或免疫荧光分析等方法检测病毒复制水平。
五、木瓜蛋白酶样蛋白酶抑制实验：
实验步骤：
1.准备Acriflavine溶液：将Acriflavine溶解于适当溶剂中，调整浓度。
2.与酶反应：将Acriflavine加入木瓜蛋白酶样蛋白酶的反应体系中，孵育。
3.测量酶活性：通过酶活性检测方法，如底物裂解实验，评估Acriflavine对酶活性的抑制效果。

CML mice are treated daily with acriflavine (8 mg/kg) or PBS via intraperitoneal injection, for 10 days starting from day 7 after bone marrow transplantation [2].