Pyronin Y (Pyronine G) is an intercalating cationic dye that shows specificity towards RNA.

Pyronin Y与双链核酸（尤其是RNA）形成荧光复合物，便于流式细胞术中对细胞RNA进行半定量分析，以估计福尔马林固定的EL4白血病肿瘤细胞中每个细胞的RNA含量。该技术已被用来对人类网织红细胞中的RNA进行染色，以便后续的流分析和排序[2]。在活细胞中，该染料也积累在线粒体中。当浓度在1.7至3.3μM时，Pyronin Y几乎专门定位在培养细胞的线粒体中，与另一种线粒体探针，rhodamine 123类似。在该浓度下，PY并不具有毒性，但会抑制细胞增长，导致细胞停滞[3]。

使用方法：
a.溶液配制：
1. 母液配置：配置成一定浓度的Pyronin Y 母液，分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
2. 工作液配置：根据实验需求选择合适的工作液浓度，如将其稀释成浓度为1 μg/μL的工作液，尽量现配现用。
b.操作步骤
1.细胞准备：
悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。
贴壁细胞：消化，离心并收集细胞，加入 1 mL PBS，充分混匀后再次离心，加入 300 μL PBS 重悬细胞。细胞密度控制在 1×106 个细胞。
2.加入1 μL Pyronin Y （1 μg/μL），避光放置冰上 20min。
3.上机进行流式细胞分析。