Lucigenin (NSC-151912) (L-6868) is a chemiluminescent probe used to indicate the presence of endogenously generated superoxide anion radicals in cells.

当Lucigenin通过一个自由基种类进行单电子还原后，其后形态的Lucigenin展现出可测量的放大化学发光，可与系统中存在的相应反应性自由基种类的数量相关联。除了指示细胞中自由基的存在外，Lucigenin还显示与氧化还原活性的氧化还原酶发生相互作用。研究表明，Lucigenin介导黄嘌呤氧化酶还原细胞色素C并增加NADPH氧化速率。

使用方法
1. 配置 Lucigenin 溶液：
使用适当的溶剂（如 PBS 或 HEPES 缓冲液）将 Lucigenin 溶解，常用浓度为 10–50 µM，具体可根据实验需求优化。
溶液应现配现用，避免长时间储存以防降解。
2. 实验准备：
将细胞接种于合适的培养皿或微孔板中（通常为 96 孔板）。
处理细胞以诱导超氧阴离子自由基的生成（例如加入特定刺激物或药物）。
3. 加入 Lucigenin：
将 Lucigenin 溶液（1~10uM）加入细胞培养体系中，确保与刺激物共孵育。通常在 37°C 下孵育，时间为 10–60 分钟，具体根据实验优化。
4. 化学发光检测：
使用化学发光检测仪器（如微孔板读板机或荧光光度计）测定发光信号。
化学发光的强度与超氧阴离子的产生量成正比。
5. 数据分析：
对比实验组与对照组的发光强度，评估超氧阴离子生成的水平。
可结合抗氧化剂或酶（如超氧化物歧化酶，SOD）进行验证实验。