Hoechst 33342 trihydrochloride (bisBenzimide H 33342 trihydrochloride;HOE 33342 trihydrochloride) is a membrane permeant DNA stain with blue fluorescence.

使用方法
一、溶液制备
1.储备液： 将 Hoechst 33342 trihydrochloride 溶解于去离子水或适当的溶剂（如 PBS）中，通常制备为 1 mg/mL 的储备液。
2.工作液： 根据实验需要，将储备液稀释至工作浓度，通常为 10 µg/mL。具体浓度可根据实验需要进行优化。
二、操作步骤
1.细胞培养： 将细胞接种到适当的培养皿中，直到达到适当的密度。
2.染色： 在培养基中添加 Hoechst 33342 工作液，孵育 10–30 分钟，通常在 37°C 下孵育。对于活细胞染色，时间可根据实验需求调整。
3. 洗涤： 使用 PBS 洗涤细胞，去除未结合的染料。
4.成像： 使用荧光显微镜观察细胞。Hoechst 33342 在紫外光（360–365 nm）激发下发射蓝色荧光（455 nm）。
5.应用领域：
1）细胞周期分析： Hoechst 33342 可用来标记细胞核中的 DNA，结合到 DNA 上，可用于流式细胞术（FACS）分析细胞周期。
2）染色体研究： 它常被用作染色体染色剂，帮助观察细胞分裂中的染色体。
3）活细胞成像： 由于其膜通透性，它可用于活细胞的成像，提供细胞核的清晰可视化。
注意事项：
1.光敏性： Hoechst 33342 对光敏感，应避免强光直射，储存时应避光。
2.毒性： 尽管该染料适用于活细胞染色，但高浓度或长时间暴露可能对细胞产生毒性影响，因此使用时应控制染料浓度和染色时间。
3.溶解性： 确保储备液和工作液在使用前完全溶解，避免形成沉淀。