3,6-Dichlorotrimellitic anhydride serves as the essential precursor in the synthesis of various dichlorinated fluoresceins and rhodamines.

使用方法
一、溶液制备
1.储备液：将 3,6-Dichlorotrimellitic anhydride 溶解于适当的溶剂中，如无水 DMSO 或 DMF，制备浓度为 1–10 mM 的储备液。
2.工作液：根据实验需求，使用实验缓冲液（如 PBS，pH 7.4）稀释至合适的工作浓度，通常为 1–10 µM。
二、实验步骤
1.合成氯化荧光素或罗丹明衍生物
1）将 3,6-Dichlorotrimellitic anhydride 与适当的氨基荧光素或罗丹明分子反应，通常在无水溶剂中进行反应。
2）反应条件：常在 50–70°C 下进行反应，反应时间为 2–6 小时。
3）反应后，使用适当的溶剂（如甲醇或水）进行纯化，去除未反应的原料和副产品。
2.标记寡核苷酸或DNA
1）将合成的二氯化荧光素或罗丹明衍生物与目标寡核苷酸或DNA 进行标记。
2）通常通过共价结合的方式，利用氯化荧光素或罗丹明与核酸的氨基或氨基甲酸基团反应进行标记。
3）反应时间：在 4°C 下孵育 1–2 小时，反应完成后使用凝胶电泳或液相色谱法（HPLC）纯化标记的DNA或寡核苷酸。
3. 校准与对照
1） 对照组：使用未反应的荧光染料或标记的DNA作为对照，确保标记反应的特异性。
2） 标准曲线：通过已知浓度的标记DNA样品，建立荧光信号与浓度之间的标准曲线。
注意事项
1）光敏性：合成的氯化荧光素和罗丹明衍生物通常具有较强的光敏性，实验过程中避免强光照射，以防止荧光信号衰减。
2）储存条件：3,6-Dichlorotrimellitic anhydride 和合成的荧光标记物应储存于 -20°C，避光条件下。
3）溶解性：3,6-Dichlorotrimellitic anhydride 溶解时可能会释放出氯气，实验时应在通风良好的地方进行操作。