Pyronine B (NSC 44690) is a fluorophore with low relative fluorophore brightness and a small hydrophobic (SH) protein channel inhibitor, which is used for staining of bacteria and mycobacteria and in the spectrophotometric determination of ultra-trace ruthenium.

使用方法
一、溶解与配制：
Pyronine B 通常以粉末形式提供，可以使用适当的溶剂（如二甲基亚硫酰胺（DMSO）或乙醇）进行溶解。Pyronine B 的工作浓度通常在 1 µM 到 10 µM 之间，根据具体实验要求调整。对于分光光度法测定，Pyronine B 可以被稀释至所需浓度，在水性缓冲液或溶剂中配制。
二、细菌和霉菌染色：
1.染色程序：准备好 Pyronine B 的工作溶液后，将其加入到细菌或霉菌培养物中，通常使用浓度为 1-10 µM。
2.将染料与细胞共孵育 10 至 30 分钟，具体时间可根据所需的荧光强度进行优化。
3.染色后，需要通过洗涤去除多余的染料。
4.荧光显微镜观察：
1）Pyronine B 在大约 535 nm 激发下发出大约 570 nm 的荧光。
2）由于 Pyronine B 的荧光强度相对较低，因此适合在需要较少背景荧光的情况下使用。
三、 超痕量钌的分光光度法测定：
1.反应程序：
1）将 Pyronine B 溶液与钌样品混合，根据需要调整 pH（通常在 5-7 范围内，以获得最佳灵敏度）。
2）在特定的波长下（通常在 570 nm 附近）测量溶液的吸光度，以通过络合物的强度来推断钌的浓度。
注意事项
1.Pyronine B 应存放在阴凉干燥处，避免长时间暴露于光线下，以防止光降解。
2.Pyronine B 溶液应存放在 -20°C 条件下，并尽量避免反复冻融。