方法:通过体外细胞实验与分子生物学检测，评估 STAT3-IN-3 对 STAT3 及上下游相关激酶磷酸化水平、肿瘤细胞增殖、靶基因表达、STAT3 DNA 结合能力的影响；同时检测活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位及凋亡相关蛋白裂解水平，阐明其促凋亡机制。
结果:
1.STAT3-IN-3 不改变 STAT1、JAK2、Src 与 Erk1/2 的磷酸化水平，作用具有一定靶点特异性 。
2.STAT3-IN-3 可显著抑制多种肿瘤细胞增殖，对 MDA‑MB‑231、HCT‑116、HepG2、MCF‑7 细胞的 IC₅₀分别为 1.43 μM、1.89 μM、2.88 μM、3.33 μM 。
3.STAT3-IN-3 能够有效抑制 STAT3 酪氨酸及丝氨酸磷酸化，减弱 STAT3 的 DNA 结合活性，并下调下游靶基因 Bcl-2、Cyclin D1 的表达 。
4.以 1–4 μM STAT3-IN-3 干预细胞 24 h 后，细胞内 ROS 生成增多、线粒体膜电位下降，进而激活线粒体凋亡通路；同时可促进 caspase-9、caspase-3 及 PARP 蛋白裂解，启动细胞凋亡程序 [1]。

方法:采用 4T1 乳腺癌移植瘤动物模型，以 10 mg/kg～20 mg/kg 剂量的 STAT3-IN-3 每日腹腔注射给药，连续干预 14 d，观察并评价其体内抗肿瘤效果。
结果:STAT3-IN-3(10～20 mg/kg，腹腔注射，每日 1 次，连续 14 d)可显著抑制体内 4T1 乳腺移植瘤的生长，展现出良好的在体抗肿瘤活性 [1]。