Ninhydrin is a chromogenic analytical probe for the quantification of proteins and amino acids.

Chromogenic analytical probe:

一、氨基酸分析
1. 材料准备
1）Ninhydrin 溶液：配制为 0.2%–1% 的乙醇或丙醇溶液。
2）氨基酸标准溶液或待检测样品。
3）缓冲液：常用柠檬酸缓冲液或 pH 5.5–6.5 的其他缓冲液。
4）加热设备：如水浴或恒温加热装置。
2. 步骤
1）准备反应体系：在试管中加入一定体积的样品溶液和适量的 Ninhydrin 溶液（通常为样品体积的 1:1）。
加入缓冲液调整反应条件（可选）。
2）加热显色：在 90–100°C 下加热反应体系 10–20 分钟，生成蓝紫色或黄色化合物（Ruhemann's 紫色）。
3）冷却与检测：冷却反应体系至室温；使用分光光度计在 570 nm（蓝紫色）或其他适当波长处测量吸光度，计算氨基酸浓度。
二、蛋白质检测
1.. 材料准备
1）Ninhydrin 溶液（0.5%–1% 丙醇溶液）。
2）蛋白质样品溶液。
30缓冲液（如磷酸盐缓冲液）。
2. 步骤
1）反应准备：在样品溶液中加入等体积的 Ninhydrin 溶液，并轻轻混匀。
2）加热显色：加热混合物至 90–100°C，持续 15 分钟，颜色反应取决于氨基酸类型和浓度。
3）检测：冷却后使用分光光度计在特定波长（通常为 570 nm）测定吸光度，用标准曲线定量分析。
注意事项
1）操作安全：Ninhydrin 是一种潜在的致敏物，操作时需佩戴手套和护目镜，并在通风良好的地方进行实验。
2）避光保存：Ninhydrin 对光敏感，溶液应避光储存，建议短期保存于 4°C，长期储存于 -20°C。
3）优化反应条件：根据样品特性，适当调整 pH、温度和反应时间，以获得最佳结果。