EphB4-IN-2 (compound 66) 在基于 FRET 的酶促实验中可强效抑制重组 EphB4 激酶活性，IC 50 为 5 nM (10 pM-20 μM; 2 h)；在基于[γ- 33 P]ATP 的酶促实验中同样抑制重组 EphB4 激酶活性，IC 50 为 1.6 nM (110 pM-10 μM; 30 minutes)。此外，EphB4-IN-2 对 10 种受试重组 Eph 受体激酶中的 9 种表现出强效抑制作用，IC 50 为 1.1-15 nM，但对 EphA7 的抑制活性明显较弱，IC 50 为 1118 nM (110 pM-10 μM; 30 minutes)。在 1 μM 条件下，EphB4-IN-2 可强效抑制重组 EphA2、EphB3、Src、Lck 和 Yes1 激酶，对 CSK、BTK 和 HER-4 具有中等活性，而对大多数其他受试激酶活性较低；同时，其可高亲和力结合 49 种受试重组激酶中的 15 种小型守门残基激酶，这些激酶主要属于 Eph、Src 和 Abl 家族 (1 μM).