UNC10088 (0.5 μM，15 分钟) 通过结合至 FBXO22 的 C326，促使三元复合物的稳定形成，进而驱动 SCF FBXO22 依赖的 NSD2 PWWP1 结构域的多聚泛素化。这个过程依赖于关键相互作用残基 (例如 FBXO22 的 E362、K229 和 E169，以及 NSD2 的 F266、E272 和 K253)，其中的突变会破坏复合物的稳定性或降解剂的定位，并抑制泛素化。UNC10088 (5 μM，1 小时) 与 FBXO22 FIST 结构域的结合完全依赖于 Cys326，因为 C326A 突变会消除复合物的形成，而在半胱氨酸缺失的背景中重新引入时可恢复复合物的形成。在引入 FBXO22 后，UNC10088 (1 小时) 的 IC 50 值降低了 2.5 倍 (从 248 nM 降至 101 nM)，表明存在正协同结合，α 因子为 3.3。UNC10088 明显提高了野生型 FBXO22 中 FIST 结构域的熔解温度 (Tm)；而 UNC10088 对 C326A 突变体的 Tm 值几乎没有影响。