PDL1 degrader-3 (compound e24) 在 RKO 细胞中以20 μM的浓度处理24小时，可有效降低PD-L1蛋白的表达，其活性优于JQ-1，且呈现较低的细胞毒性。PDL1 degrader-3 (1-20 μM; 3-24 h) 对人结直肠癌 RKO 细胞和人肺癌 H1975 细胞中的PD-L1蛋白表达呈现出剂量和时间依赖的降低；在24小时后，RKO细胞浓度≥5 μM、H1975细胞浓度≥10 μM时即可观察到显著下调，并且在20 μM浓度下，两种细胞系从3小时开始就出现显著下调。PDL1 degrader-3 (5-20 μM; 3-24 h) 同样以剂量和时间依赖的方式降低这两种细胞系的细胞膜PD-L1表达；在24小时后，10 μM和20 μM浓度下，均观察到显著的下调效果，在20 μM浓度下从6小时开始即出现显著下调。通过免疫荧光检测，PDL1 degrader-3 (5-20 μM; 24 h) 以剂量依赖方式在RKO和H1975细胞中降低PD-L1蛋白表达，在24小时后，10 μM和20 μM浓度下效果显著。即使在20 μM浓度下作用24小时，对RKO和H1975细胞的细胞活力没有显著降低。该化合物 (20 μM; 24 h) 亦能抑制PD-L1/PD-1的结合，并增强T细胞对两种癌细胞的杀伤作用。PDL1 degrader-3 (1-20 μM; 3-24 h) 对RKO细胞中的PD-L1 mRNA表达无显著影响，表明其作用于蛋白水平。在与60 μg/mL CHX联合处理12小时内，该化合物可显著缩短PD-L1蛋白的半衰期，通过20 μM; 12 h诱导PD-L1降解，作用通过泛素-蛋白酶体通路进行，并被10 μM MG132阻断而非溶酶体或自噬抑制剂。PDL1 degrader-3 (20 μM; 6 h) 也提高了RKO细胞中PD-L1的多泛素化水平，证实其通过泛素-蛋白酶体途径降解PD-L1。在RKO细胞中，PD-L1的下调依赖于CSN5，过表达CSN5阻断该下调，而敲低则增强效应。PDL1 degrader-3 (10-320 μM; 3 min) 可直接结合RKO细胞中的CSN5蛋白，并且CSN5的热稳定性随浓度增加而增强。PDL1 degrader-3 特异性结合野生型CSN5，K d为4.53 μM，且关键结合相互作用由Asp151和Lys210残基介导。

PDL1 degrader-3（化合物 e24）（腹腔注射；每日给药；连续 16 天，剂量 2.5-10 mg/kg）可有效抑制 C57BL/6J 小鼠皮下 MC38 结直肠癌的生长，在 10 mg/kg 时抑制率达 78.88%，并在剂量依赖下减少免疫抑制性 Treg 和 MDSC，同时激活肿瘤浸润的 CD8+ T 细胞。其对 C57BL/6J 小鼠皮下 Lewis 肺癌的抑制作用（腹腔注射，每日 1 次，剂量 2.5-5 mg/kg，16 天）在 5 mg/kg 时抑制率为 88.56%，并调控肿瘤免疫微环境以增强抗肿瘤免疫活性。在 T 细胞缺陷裸鼠中，PDL1 degrader-3（10 mg/kg，腹腔注射）不抑制 MC38 结直肠癌生长，而 5 mg/kg 剂量对 Lewis 肺癌无抑制作用，表明其抗肿瘤活性依赖于功能性 T 细胞。在 C57BL/6J 小鼠中，PDL1 degrader-3（10 mg/kg，腹腔注射，18 天）与抗 CTLA-4 抗体联用，显著增强抗肿瘤免疫效果，优于单药治疗。