Novobiocin 与 Hsp90 相互作用，改变了该分子伴侣对 geldanamycin 和 radicicol 的亲和力，并导致体外和体内关键的Hsp90依赖性激酶（如 v-Src、Raf-1 和 p185(ErbB2)）的消耗。Novobiocin 干扰辅助蛋白 Hsc70 和 p23 与 Hsp90 的结合。[1] Novobiocin 以浓度依赖的方式抑制依赖血红素调控的 eIF2alpha 激酶（HRI）成熟。Novobiocin 诱导 Hsp90 和 Cdc37 从未成熟的 HRI 解离，而 Hsp90 的辅助蛋白 p23、FKBP52 和蛋白磷酸酶5 仍与未成熟的 HRI 关联。[2] Novobiocin 引起形态学和生化变化，导致细胞死亡并呈现后生动物细胞凋亡的典型特征。[3] 作为HSP90抑制剂的 Novobiocin 可降低 SMYD3 表达，并剂量依赖性抑制 MDA-MB-231 人乳腺癌细胞的增殖和迁移。Novobiocin 能够抑制乳腺癌细胞的迁移，其机制可能涉及 SMYD3 的下调。[4] 作为氨基Coumarin 类抗生素的 Novobiocin 干扰热休克蛋白90和缺氧诱导因子依赖的基因表达，从而危及细胞存活。Novobiocin 导致细胞内钙离子 ([Ca(2+)]i) 显著增加、前向散射减少、安纳新-V 结合增加，并增强神经酰胺形成。Novobiocin 刺激红细胞死亡，这一效应至少部分是由外部 Ca(2+) 进入和神经酰胺形成所致。[5]