Fluorescein diacetate 作为一种荧光底物，适用于体外评估GSTP1-1抑制剂的活性。乙烯丙酸（EA）和NBDHEX能够依赖浓度抑制hGSTP1-1介导的 Fluorescein diacetate 的荧光增加，其IC50分别为3.3±0.5 μM和0.61±0.04 μM。 Fluorescein diacetate （FDA）是绿色荧光染料荧光素的乙酰化衍生物，作为一种活细胞染料的荧光探针，通过人体Pi类谷胱甘肽S转移酶（hGSTP1）的特异性酯酶活性被激活发光，而在多种细胞质GST中选择性较高。在外源性过表达hGSTP1的MCF7细胞中观察到 Fluorescein diacetate 的荧光激活对GST抑制剂敏感，但在过表达hGSTA1或hGSTM1的细胞中则未观察到。为探究荧光激活是否由hGSTP1活性引起，体外将 Fluorescein diacetate 与重组的hGSTP1-1及GSH一同孵育。在hGSTP1-1和GSH存在的情况下观察到显著的荧光激活，而在缺少其中任一或酶被热灭活的情况下仅观察到轻微激活。这表明 Fluorescein diacetate 的荧光激活依赖于hGSTP1-1的活性。根据荧光增加速率与hGSTP1-1浓度之间的线性关系，确定1 μM Fluorescein diacetate 的特定酶活性为79±15 nmol/min/mg蛋白。