DiD perchlorate is a lipophilic cyanine dye that can be used in cells tracking.

注射染色细胞两周后，在骨膜距离15至40μm范围内发现了单个明亮的DiD perchlorate (DiD)阳性细胞。研究结果显示，随时间推移，细胞聚集体逐渐出现，其染料强度逐渐减弱，这与DiD perchlorate标记在细胞分裂时的分配一致[1]。

一、 细胞追踪
1.溶液准备：通常将 DiD 溶解在溶剂如二甲基亚砜 (DMSO) 中，制备成浓度为 1 至 10 μM 的储备溶液。
2. 标记：将 DiD 溶液加入培养的细胞中，经过 10 至 30 分钟的孵育后，染料会被细胞吸收，并整合到脂质双层中。孵育后，用 PBS 洗去未结合的染料。
3.成像：使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察，DiD 在远红色波段（665-680 nm）发射，可以与其他荧光标记物共同使用，进行多重实验。
4. 细胞追踪：DiD 标记的细胞可以在体外或体内进行追踪，研究人员可以观察细胞的迁移、增殖或在组织中的定位。
二、膜标记
1.膜标记：DiD 与细胞膜结合，可以标记细胞表面或膜蛋白，观察膜的结构和动态变化。
2. 成像：用荧光显微镜观察标记的细胞，分析膜蛋白的分布和变化。
三、流式细胞术
1.细胞准备：按照上述方法标记细胞。
2.流式细胞术：使用流式细胞仪分析标记细胞的荧光强度。由于 DiD 发射在远红色范围，因此可以与其他常见的荧光探针一起使用，进行多重标记分析。
四、研究脂质筏动态
1. 标记脂质筏：DiD 能够与脂质筏结合，可以用于监测其在各种细胞过程中的组织，例如细胞信号传导、膜融合和内吞作用。
2.分析：标记细胞后，使用荧光显微镜观察脂质筏在刺激后的变化。