CY5-SE triethylamine salt (Fluorolink Cy5 triethanolamine salt) is a hydrophilic amine-reactive fluorescent probe. It displays excitation/emission maxima of 646/662 nm, respectively. Cy5-SE-conjugated ligands have been used in the characterization of hematopoietic tumor microenvironments.

使用方法
一、 试剂准备
1.母液配置：使用DMSO（或其他适当的溶剂），浓度可根据实验需求，一般为1 mM。
2.工作液配置：如果需要用于标记，可以根据需要使用PBS或其他适合的缓冲液进行稀释。工作浓度一般在10–100 µM之间，具体浓度根据实验设计调整。
二、操作步骤
1.标记过程：
1）标记蛋白质、肽或寡核苷酸：将CY5-SE与目标分子（如蛋白质、肽、寡核苷酸等）混合。在常温下，反应一般需要30分钟到1小时。反应条件可以在pH值为7-8的缓冲液中进行。
2）反应条件：CY5-SE与目标分子的氨基基团（如氨基酸的氨基、肽链的氨基）反应，因此目标分子应具有可供反应的氨基基团。
3） 清除未反应的染料：完成反应后，可以使用透析、凝胶过滤或超滤等方法去除未结合的染料。这样可以确保标记的纯度并减少背景荧光。
2. 荧光检测：
1）荧光显微镜或流式细胞仪：标记后的样品可通过荧光显微镜或流式细胞仪检测，激发波长为649 nm，发射波长为670 nm。
2）荧光强度测定：荧光信号的强度与标记分子的数量成正比，通过检测信号强度，可以定量分析目标分子。
3. 数据分析：
1）荧光定量分析：根据荧光强度的变化，可以计算目标分子的浓度。荧光强度可以与标准曲线进行比对，进一步定量分析。
2）对照组：对照组和实验组之间的荧光强度差异有助于评估实验中不同处理条件对目标分子标记效果的影响。