方法：SY-5609 （CDK7-IN-3）（25,50,100,250,500nM）处理HCC70细胞，在处理后6、24和48 h采集蛋白样本。免疫印迹法检测Phospho-CDK2 T160、总CDK2、c-MYC、MCL1、cyclinB1、RNAPII Ser5磷酸化和总RNAPII蛋白水平；SY-5609 （CDK7-IN-3）（100,250,500nM）处理HCC70、MDA-MB-468、CAOV3、OVCAR3和HDF细胞48和72 h, Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)检测细胞凋亡。
结果：用SY-5609 （CDK7-IN-3）处理HCC70细胞24和48小时，通过丧失CAK功能抑制CDK2在Thr160位点的磷酸化；在TFIIH中抑制CDK7可导致RNA聚合酶II c端七肽重复序列中Ser5的磷酸化降低，并降低cMyc的水平; SY-5609 （CDK7-IN-3）处理仅在48 h时导致轻度的MCL1蛋白减少；通过Annexin V/PI染色检测，SY-5609 （CDK7-IN-3）在48和72小时诱导了多种癌细胞系的凋亡，并将细胞周期阻滞在G2/M，但在原代成纤维细胞系中没有。[1]

方法：SY-5609 （CDK7-IN-3）（2mg /kg，口服，每天一次，21天）给药于HCC70细胞系衍生的异种移植模型，每周两次测量肿瘤体积和体重。采用单尾t检验评价SY-5609 （CDK7-IN-3）抗肿瘤作用的显著性。
结果：在经过SY-5609 （CDK7-IN-3）治疗后的小鼠体内血浆暴露量为261.28 ng h/mL, Cmax为50.67 ng/mL (103 nM)，消除半衰期为3.33 h。在21天的给药期内，肿瘤消退，耐受性良好，第28天未见肿瘤再生。[1]