Alizarin Red S sodium (ARS sodium) (ARS sodium) is an anthraquinone dye. Which has been widely used to evaluate calcium deposits in cell culture[1].

溶液配置
母液的配置：配置为 2% 的 Alizarin Red S sodium 水溶液。
工作液配置：用氢氧化铵，调 PH 至 4.2，将溶液用 0.45 μm 微滤器过滤并保存在琥珀色瓶中并在使用前用 0.22 μm 微滤器重新过滤该溶液。

一、Alizarin Red S sodium 检测成骨细胞分化
操作步骤
1.诱导成骨细胞分化: MC3T3-E1 细胞以每孔 1×105 个细胞接种在四孔板上，在含 10% 胎牛血清的 α-MEM （不含抗坏血酸） 中培养，用含抗坏血酸 （50 μg/mL） 和 β-甘油磷脂 （10 mM） 的成骨培养基 （OSM） 诱导成骨细胞分化。
2.染色: MC3T3-E1 细胞用 1×PBS 洗涤，70% 乙醇室温固定 10 min，蒸馏水冲洗后，用 Alizarin Red S 染色 10 min，检测基质中钙沉积。
3.数据分析: 红色区域的面积与成骨细胞分化成正比。
二、Alizarin Red S sodium 对滑膜液中钙化合物进行筛选试验
1.滑膜液制备: 将滑膜液吸到一次性注射器中，然后将液体转移到含有肝素钠抗凝剂的干净试管中；
2.染色: 从试管底部吸出一滴滑膜液，放在干净载玻片上，与一滴 2% Alizarin Red S 混合，盖上盖玻片；
c3混合后三分钟内，通过普通光学显微镜观察，并对每个高倍视野中观察到的橙红色染色浓块的程度进行分级。红色区域的面积与钙化合物含量成正比。