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V5 Tag Nanobody Immunomagnetic Beads

Name: V5 Tag Nanobody Immunomagnetic Beads
Brand: TargetMol
SKU: C0157
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 C0157

别名 V5TagNanobodyImmunomagneticBeads, V5 Tag 纳米抗体免疫沉淀磁珠

TargetMol的V5 Tag 纳米抗体免疫沉淀磁珠可特异性地与带有 V5标签的蛋白结合，可以用于蛋白质、蛋白质复合物、蛋白质核酸复合物和其他抗原的免疫沉淀（IP）。本品适用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等来源的抗原样品。
纳米抗体（Nanobody）是一类来源于骆驼科动物（如骆驼、羊驼）的天然重链抗体的可变区片段（VHH），是目前已知最小的天然功能性抗体结构单元，通常只有约12–15 kDa，为传统IgG抗体的十分之一。纳米抗体较传统IgG抗体体积更小、亲和力更高、无轻重链干扰，能够更接近目标蛋白表位，减少空间位阻，同时不易脱落，洗脱条件温和，对样品保持更高的生物学活性。

规格	价格	库存
500 μL	¥ 3,050	5日内发货
1 mL	¥ 5,160	5日内发货
5 mL	¥ 24,800	5日内发货

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TargetMol 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，不能被用于人体，我们不向个人提供产品和服务。请您遵守承诺用途，不得违反法律法规规定用于任何其他用途。

实验操作小课堂

常见问题解答

问Cocktail 系列的使用方法？

答在室温下解冻，开盖前请低速离心一下，以便将黏附于管壁的液体甩至管底。然后在实验前以 1:100（v/v）稀释至溶液样品（细胞裂解液或组织提取液）。

问蛋白酶抑制剂 cocktail C0001 使用时加到蛋白液中的有效抑制时间有多久？

答这个我们暂时没有准确的数据，因为它对不同样品不同蛋白的保护程度是不一样的。一般单次提取以后，不加蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白会在 24 h 后发生明显降解，加了蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白可以维持 48 h 不降解。如果提取后置于 -20℃ 储存的话，一般加了蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白可以至少储存一个月，冻融三次；但时间长了或者冻融次数多了的话，蛋白还是会发生降解的，不同蛋白降解时间不一样的。

问使用 CCK8 进行实验后，发现读值低，不变色、没差异等，应该怎么办？

答CCK8 在孵育 1-4 小时后，OD 读值在 1-2 之间为佳，线性关系比较好。关于 CCK8 的使用问题，通常建议调整细胞状态、增加种板数量、改变加药浓度、延长孵育时间等。

问三款 RIPA 裂解液有什么区别？

答RIPA 裂解液(强)、RIPA 裂解液(中)、RIPA 裂解液(弱)的有效裂解成分、裂解强度不同，建议查询官网，有三款RIPA裂解液的比较表。

问TargetMol蛋白酶抑制剂是否可以和其他公司的磷酸酶抑制剂一起使用？

答可以一起使用。

产品信息

V5 Tag纳米抗体免疫沉淀磁珠	特性
粒径	2 μm
结合能力	≥ 1.5 mg V5标签蛋白/mL 磁珠
保存溶剂	20 mM PBS, 5% BSA
应用推荐	IP , Co-IP, ChIP、RIP

产品特点

无抗体链干扰：无论使用变性或非变性洗脱，免疫沉淀产物中均不会混入抗体轻链或重链，便于后续WB分析。
超高亲和力：具nM级结合能力，适用于表达量低或难转染的细胞样本。
结合能力强：采用定向偶联工艺，10 μL磁珠可结合约15 μg目标重组蛋白。
高特异性：经10余种空白细胞系验证，几乎无非特异性吸附。
标签识别灵活：可特异性结合1×或3×Flag标签，可识别诱饵蛋白N端或C端的标签，兼容性广。
抗热稳定：经45℃高温测试，耐受运输波动及常温放置，稳定可靠。

自备试剂

试剂	可选配方
洗涤缓冲液 Washing Buffer (1×)	TBST: 50 mM Tris-HCl，150 mM NaCl, 0.1%(v/v) Tween-20，pH7.4
酸性洗脱缓冲液 Acidity Elution Buffer	0.1M Glycine，0.1% (v/v) Tween-20，pH2.5
中和缓冲液 Neutralization Buffer	1 M Tris-HCl, pH 9.0

操作说明

1. 细胞裂解液制备
选择合适的裂解液处理细胞样品，按照标准步骤制备细胞裂解液，置于冰上备用，或于-20℃长期保存。

2. 磁珠预处理
1)将免疫沉淀磁珠用漩涡振荡器振荡1 min，使磁珠重新悬浮，取20~30 µL磁珠悬液放入1.5 mL EP管中。
2)向EP中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤，温和翻转EP管数次，使磁珠重新悬浮。将EP管放入磁性分离器，静置1 min，进行磁性分离，吸去上清液，取下EP管。重复上述洗涤步骤2次。

3. 免疫沉淀步骤
1)向EP管中加入500 μL制备好的细胞裂解液，将EP管放在旋转混合仪上，在37℃下旋转混合30 min。如结合力较弱，可在室温下孵育1 h，或在4℃下孵育过夜。
2)孵育结束后，进行磁性分离，弃去或保存上清以供后续分析。
3)向EP管中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤。进行磁性分离，吸去上清液，取下EP管，重复洗涤磁珠3次。

4. 抗原洗脱
提供以下几种抗原洗脱方案，用户可根据后续检测的需要选择不同的洗脱方法。
1)变性洗脱法：此方法洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测。向EP管中加入100 μL SDS-PAGE Loading Buffer（自备），混合均匀，95℃加热5 min。然后进行磁性分离或者离心（室温，13000 g, 10 min），收集上清液，进行SDS-PAGE检测。
2)酸性洗脱法：向EP管中加入100 μL Acidity Elution Buffer，置于旋转混合仪上在37℃孵育5-10 min。然后进行磁性分离或者离心，收集上清液。如需中和酸性洗脱液，可向100 μL洗脱液中加入50 μL Neutralization Buffer，调整pH至中性。
注：纳米抗体磁珠没有轻重链污染问题，建议首选变性洗脱法，洗脱效率更高。

保存条件

4℃，1年。

注意事项

避免冷冻磁珠。磁珠应保存在储存溶液中，防止干燥。
为了减少磁珠的损失，每次磁性分离的时间不应少于1 min。
在从磁珠保存管中取出磁珠之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
建议使用质量较好的移液器吸头和反应管，以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
操作者可根据实际需求，利用抗体结合反应步骤和抗原结合反应步骤中收集的上清液，检测抗体、抗原与磁珠的结合情况。
在IP实验中，不同类型的抗体和抗原结合的亲和力会有所不同。如果使用本说明书推荐的缓冲体系未能获得理想的实验结果，操作者可以自行筛选和配制缓冲液进行实验。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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C0157-V5 Tag 纳米抗体免疫沉淀磁珠说明书-中文(1.0 MB)