Myc Tag Agarose

• 物理化学稳定性良好
• 配基不易脱落
• 耐用性强
• 使用便捷

• 蛋白质及蛋白质复合物的免疫沉淀（IP）和免疫共沉淀（Co-IP）。
• Myc标签蛋白纯化。

1. 细胞裂解液制备
选择合适的裂解液处理细胞样品，按照标准步骤制备细胞裂解液，置于冰上备用，或于-20℃长期保存。

2. 凝胶预处理
1)将琼脂糖凝胶用漩涡振荡器振荡1 min，使凝胶重新悬浮，取25~50 µL凝胶悬液放入1.5 mL EP管中。
2)向EP中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤，温和翻转EP管数次，使凝胶重新悬浮。
3)将EP管放入离心机，1000 rpm离心5 min，使凝胶沉降到离心管底部后弃去上清。重复上述洗涤步骤1次。

3. 免疫沉淀步骤
1)向EP管中加入制备好的含有MYC标签标记的蛋白样品，将EP管放在旋转混合仪上，在室温下孵育1-2 h，或在4℃下孵育2-4 h。
2)孵育结束后，1000 rpm离心5 min，收集凝胶，弃去或保存上清以供后续分析。
3)向EP管中加入1000 μL Washing Buffer进行洗涤，轻柔混匀5∽10 min。1000 rpm离心5 min，收集凝胶，弃去上清。再重复洗涤2次。

4. 抗原洗脱
提供以下几种抗原洗脱方案，用户可根据后续检测的需要选择不同的洗脱方法。
1)变性洗脱法：此方法洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测。向EP管中加入100 μL SDS-PAGE Loading Buffer（自备），混合均匀，95℃加热5 min。然后进行离心分离凝胶，收集上清液，进行SDS-PAGE检测。
2)酸性洗脱法：向EP管中加入100 μL Acidity Elution Buffer，置于旋转混合仪上在37℃孵育5-10 min。然后进行离心分离凝胶，收集上清液。如需中和酸性洗脱液，可向100 μL洗脱液中加入50 μL Neutralization Buffer，调整pH至中性。

4℃，2年。

• C0134-Myc Tag 琼脂糖凝胶说明书-中文(0.96 MB)

1. 凝胶应保存在储存溶液中，防止干燥。
2. 在从保存管中取出琼脂糖凝胶之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
3. 操作者可根据实际需求，利用抗体结合反应步骤和抗原结合反应步骤中收集的上清液，检测抗体、抗原与凝胶的结合情况。
4. 在IP实验中，不同类型的抗体和抗原结合的亲和力会有所不同。如果使用本试剂盒提供的缓冲体系未能获得理想的实验结果，操作者可以自行筛选和配制缓冲液进行实验。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。