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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
500 T | ¥ 184 | 5日内发货 | |
1000 T | ¥ 306 | 5日内发货 |
500 T规格的产品组成如下:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
---|---|---|
C0185-1 | Bradford Protein Staining Solution | 125 mL |
C0185-2 | Bovine Serum Albumin Standard | 5 mg |
Bradford蛋白浓度测定试剂盒适用于细胞裂解液、组织提取液及纯化蛋白样品的快速定量分析。
1. 蛋白标准品的准备
1)向一管5 mg的BSA蛋白标准品中加入1 mL蛋白稀释液,充分溶解后配制成5 mg/mL的蛋白标准品溶液。配制后可长期储存于-20°C,建议分装储存避免反复冻融。
注:待测蛋白样品在什么溶液中,蛋白稀释液也宜为相同溶液。也可以用0.9% NaCl或PBS作蛋白稀释液。
2)将5 mg/mL的蛋白标准品溶液,按下表所示配制为浓度梯度稀释的蛋白标准品溶液,浓度分别为0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5 mg/mL。
标准品孔 | 蛋白稀释液(μL) | 蛋白标准品溶液(μL) | 蛋白标准品浓度(mg/mL) |
---|---|---|---|
1 | 70 | 5 mg/mL BSA溶液30 μL | 1.5 |
2 | 30 | 从1取60 μL | 1 |
3 | 20 | 从2取60 μL | 0.75 |
4 | 30 | 从3取60 μL | 0.5 |
5 | 60 | 从4取60 μL | 0.25 |
6 | 60 | 从5取60 μL | 0.125 |
7 | 60 | 0 | 0 |
2. 蛋白浓度测定
1)各取5 μL浓度梯度稀释的蛋白标准品溶液到96孔板的标准品孔中。
2)取5 μL待测样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5 μL,需加蛋白稀释液补足到5 μL。
3)各孔加入250 μL Bradford Protein Staining Solution。
4)在2 h内,用酶标仪测定595 nm波长的吸光度。
5)根据BSA标准品的吸光度,绘制标准曲线(X-蛋白浓度mg/mL;Y-A595)。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
4℃保存,一年有效。
蛋白标准品(BSA)配成溶液后可置于-20℃保存一年。
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