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背景介绍：

Disulfiram（T0054）主要作为乙醛脱氢酶（ALDH）的强效抑制剂，特异性靶向人类ALDH1和ALDH2亚型，IC50分别为0.15 μM和1.45 μM。通过共价修饰这些酶的活性位点半胱氨酸残基，Disulfiram有效阻断乙醛向乙酸的氧化反应，这是酒精代谢中的关键步骤。除了调控脱氢酶活性的经典作用外，Disulfiram还被发现能够抑制气体凝胶蛋白D（GSDMD）孔道的形成，这是炎症性程序性细胞死亡——焦亡（pyroptosis）的关键事件。这种双重功能使Disulfiram处于代谢和炎症信号通路的交汇处，涉及铜死亡（cuproptosis）、白细胞介素介导的反应、凋亡和焦亡等多条生物学途径。

Disulfiram通过抑制ALDH导致乙醛积累，使细胞对酒精暴露表现出敏感性，同时调节细胞的氧化还原状态和代谢流。焦亡过程中，Disulfiram抑制GSDMD孔道形成，阻止促炎细胞因子如白细胞介素的释放，从而调控炎症级联反应。这表明Disulfiram能够动态调节白细胞介素信号通路，通过减弱焦亡细胞死亡及其后续的细胞因子释放，影响炎症反应。此外，Disulfiram与脱氢酶的相互作用使其参与更广泛的代谢途径，包括新近发现的铜依赖性细胞死亡机制——铜死亡，显示其作为研究复杂细胞死亡模式的工具潜力。

在科研领域，Disulfiram广泛用于研究ALDH抑制的生化和细胞学效应，特别是在酒精代谢、氧化应激和代谢调控的研究中。其抑制GSDMD孔道形成的作用也使其成为探究焦亡及炎症信号分子机制的重要化合物。此外，Disulfiram对ALDH亚型的特异性及其对白细胞介素通路的影响，为研究代谢酶与免疫反应之间的相互作用提供了独特的机会。基于这些特性，Disulfiram作为一种多功能的生化探针，有助于阐明脱氢酶活性、炎症性细胞死亡及细胞因子信号传导之间的相互调控，为多种实验模型中细胞命运和免疫调节机制的研究提供了重要工具。

文献分享：

2.1 High-throughput screen of drug repurposing library identifies inhibitors of Sarcocystis neurona growth

Disulfiram(T0054)在本研究中被用于评估对Sarcocystis neurona裂殖子增殖的抑制作用。采用表达GFP和萤火虫荧光素酶的寄生虫高通量筛选方法，Disulfiram被鉴定为18种确认的抑制化合物之一，在初筛和二次筛选阶段均表现出超过80%的寄生虫生长抑制率。进一步通过不同浓度处理感染牛鼻形成细胞的寄生虫，并测量虫体荧光信号，计算Disulfiram的半数有效浓度(EC_50)，结果显示Disulfiram对寄生虫生长具有剂量依赖性抑制作用。试验的可靠性由Z′因子大于0.6数值验证，表明该检测具有良好的准确性。本研究明确了Disulfiram在体外条件下能够显著抑制S. neurona寄生虫复制，证明其在筛选化合物库中具备抑制活性。[3]

2.2 Xuanqing Hefa formula relieves sepsis-triggered acute lung injury by targeting the NLRP3/Caspase-1 pyroptosis mechanism

Disulfiram(T0054)作为复方药物旋清合法方（XQHF）中的多种活性成分之一，在本研究中表现出抑制炎症级联反应和减弱细胞焦亡的作用，从而缓解由脓毒症诱导的急性肺损伤。实验结果显示，含有Disulfiram(T0054)的XQHF显著保护肺组织结构，降低炎症反应和氧化应激，改善脓毒症小鼠的存活率。在分子水平上，Disulfiram(T0054)抑制了与细胞焦亡相关的关键蛋白表达，并在LPS加尼日霉素诱导的免疫细胞焦亡模型中减少了细胞凋亡。此外，Disulfiram(T0054)显著降低了促炎细胞因子IL-1β和IL-18的表达。该结果表明，Disulfiram(T0054)通过抑制NLRP3/Caspase-1通路，发挥抑制炎症反应及细胞焦亡的作用，参与调节脓毒症相关的肺损伤过程。[4]

2.3 Disulfiram activates autophagy via proteasome inhibition and c-Fos/beclin-1 upregulation, synergizing with chloroquine

Disulfiram(T0054)在结直肠癌细胞模型中发挥多重作用机制。该药物通过靶向p97-NPL4-UFD1轴抑制泛素-蛋白酶体通路，有效抑制蛋白酶体活性，表现为细胞内泛素化水平显著升高。蛋白酶体抑制引发补偿性自噬，且Disulfiram通过转录调控机制进一步促进自噬相关基因BECN1的表达，其机制为上调FOS基因表达，并由AP-1转录因子组分c-Fos直接结合BECN1启动子区域，增强Beclin-1的表达，从而显著提升自噬水平，呈现剂量和时间依赖性。Disulfiram的抗肿瘤活性依赖于铜离子，铜葡萄糖酸盐显著增强其杀伤肿瘤细胞的能力。Disulfiram与自噬抑制剂氯喹联合使用时，完全阻断细胞蛋白降解，导致异常蛋白质积累及细胞死亡，这种协同作用显著提升了其抗肿瘤效应。进一步的实验显示，上调NPL4表达可以减弱Disulfiram诱导的自噬增强，证实自噬激活依赖于通过NPL4轴介导的蛋白酶体抑制。综上，Disulfiram通过双重机制即蛋白酶体抑制和c-Fos/Beclin-1轴的转录激活调节自噬，并与自噬抑制剂协同增强肿瘤细胞杀伤作用。[5]

参考文献

[1] 1. Liu X, Zhang Z, Ruan J, et al. Inflammasome-activated gasdermin D causes pyroptosis by forming membrane pores. Nature. 2016;535(7610):153-158.

[2] 2. Skrott Z, Mistrik M, Andersen KK, et al. Alcohol-abuse drug disulfiram targets cancer via p97 segregase adaptor NPL4. Nature. 2017;552(7684):194-199.

[3] Bowden G, Land K, O'Connor R, Fritz H. High-throughput screen of drug repurposing library identifies inhibitors of Sarcocystis neurona growth. International Journal for Parasitology: Drugs and Drug Resistance. 2018;8(1):137-144.

[4] Lei C, Zhao C, Li X, Wang K, Cen T, Liu Q, et al.. Xuanqing Hefa formula relieves sepsis-triggered acute lung injury by targeting the NLRP3/Caspase-1 pyroptosis mechanism. Frontiers in Immunology. 2026;16():.

[5] Wang K, Wang Z, Peng W, Li G, Xiao H, Zhong Z, et al.. Disulfiram activates autophagy via proteasome inhibition and c-Fos/beclin-1 upregulation, synergizing with chloroquine. Cell Death Discovery. 2025;12(1):.