Sulforhodamine B sodium salt (Acid Red 52) is a fluorescent dye. It can be used from laser-induced fluorescence to the quantification of cellular proteins of cultured cells.

Sulforhodamine B（SRB）常作为一种不可穿透膜的极性示踪剂使用，或用于通过细胞蛋白质的测定来确定细胞密度（细胞毒性试验）。SRB试验被广泛用于以低成本进行各种筛选试验，以研究基于细胞的细胞毒性。该协议可以分为四个主要步骤：处理的准备、与所选处理的细胞孵育、细胞固定以及SRB染色和吸光度测量。此试验仅限于手动或半自动筛选，能够以高效和敏感的方式用于测试粘附细胞中的化合物。它还适用于评估基因表达调控（基因敲低、基因表达上调）的效果，以及研究miRNA替换对细胞增殖的影响。

使用方法
一、溶液制备
1.储备液：将 Sulforhodamine B sodium salt 溶解于适当的溶剂（如无水 DMSO 或去离子水），制备浓度为 1–10 mM 的储备液。
2.工作液：将储备液根据实验需要稀释到工作浓度，通常为 0.05–0.1%（w/v）的工作液。
二、操作步骤
1. 细胞培养：将适量的细胞接种到培养皿中，确保细胞生长到适当的密度。
2.染色：将工作液添加到细胞培养基中，孵育约 30–60 分钟，常温或 37°C 温育。
3.洗涤：使用 PBS 洗涤细胞，去除未结合的染料。
4.荧光测定：通过荧光显微镜或酶标仪在 540 nm 激发，560 nm 发射波长下观察或定量荧光。
三、 应用领域：
1.细胞增殖和细胞毒性测试：Sulforhodamine B 常用于测量细胞在处理后蛋白质的变化，进而反映细胞的增殖状态或细胞存活能力。
2.定量测定：细胞蛋白量可以通过 Sulforhodamine B 染色后测定其荧光强度来量化。
3.校准与对照：
1）设置不加 Sulforhodamine B 的对照组，确保实验的特异性和准确性。
2）可以通过已知浓度的细胞样本建立标准曲线，来定量蛋白质含量。