Neutral red is a vital dye, is used as an indicator and biological stain.

细胞 Neutral red 摄取实验
操作步骤：
1.细胞在 96 孔板中以正常条件培养至合适状态，达到 70-80% 的融合度。
2.配置中性红工作溶液（在中性红色摄取试验前一天制备，并在 37°C 细胞培养箱中孵育过夜）在室温（20-30℃）下4，000 g 离心 5 分钟，以去除任何沉淀。
3.96 孔板每孔加入 200 μL PBS 冲洗细胞。
4.使用排枪向每个孔中加入 100 μL 中性红工作液。
5.在 37°C培养箱（5% CO2）中孵育 2-4 小时。注意：对于RD和MRC-5细胞系，最佳孵育时间为 2 小时，较长孵育时间将导致显著的灵敏度损失。对于 Vero E6 和 A549-hACE2 细胞系，孵育时间可达 4 小时而不影响检测灵敏度；
6.每孔中加入 200 μL PBS 洗涤细胞，去除中性红工作液。
7.抽吸洗涤缓冲液，将剩余的缓冲液轻轻倒在纸巾上，或让其风干。注：在加入中性红色去染色液前，需将孔完全干燥。
8.每孔加入中性红去染液（通常为50%乙醇，1% 醋酸或DMSO）100 μL。在微滴摇板机上以 200转/min 快速摇板 15 分钟，使去染溶液完全从细胞中提取中性红，形成均匀溶液。
9.用分光光度计测定中性红提取物在 540 nm 处的吸光度。