JC-1 (CBIC2) is a fluorescent lipophilic cyanine dye. JC-1 is used to measure mitochondrial membrane potential. When the mitochondrial membrane potential is high, JC-1 aggregates into polymers within the matrix, emitting red fluorescence (λex=585 nm, λem=590 nm). When the mitochondrial membrane potential is low, JC-1 fails to aggregate within the mitochondrial matrix and exists as monomers, emitting green fluorescence (λex=510 nm, λem=527 nm).

α-synuclein:2.6 μM (Kd)

使用方法
一、溶液制备
1.母液配置：JC-1用DMSO溶解，制备成储备溶液。储备溶液的浓度通常为5mg/ml，具体浓度请参考厂家说明。
2. 工作浓度：JC-1的工作浓度通常为1-20 µg/ml，但最佳浓度可能需要根据细胞类型和实验条件进行优化。
3. 稀释：在使用前，将储备溶液用细胞培养基或适当的缓冲液稀释。
二、染色细胞
1. 细胞准备：在适当条件下（例如，37°C，5% CO₂）培养待实验的细胞。
2. 与JC-1孵育：将稀释后的JC-1工作溶液加入细胞中。根据细胞类型和实验条件，通常孵育15-30分钟。
3. 洗涤：孵育后，用预热的细胞培养基或PBS洗涤细胞1-2次，以去除多余的染料。
三、 荧光检测
1. 荧光显微镜：使用配备合适滤光片的荧光显微镜检测绿色（单体JC-1）和红色（聚集态JC-1）荧光。绿色荧光的激发波长通常为485-490 nm，红色荧光为525-530 nm，发射峰值分别为535 nm（绿色）和590 nm（红色）。
2. 流式细胞术：也可以使用流式细胞术进行定量分析。使用适当的滤光片（例如，绿色荧光使用525/40 nm，红色荧光使用585/42 nm）进行检测。
3. 数据解释：红色荧光的增加表明线粒体膜电位较高，而绿色荧光的增加则表明膜电位丧失或降低。

以上信息均来源于已发表文献，具体实验方案请根据实际研究需求进行适当调整。

CBIC2

DMSO: 14 mg/mL (21.46 mM), Sonication is recommended.