HDAC6-IN-66 (Compound 5j) 可选择性地抑制 HDAC6，其 IC 50 值为 1.8 nM，而对其他 HDAC 亚型的抑制作用明显较弱 (HDAC1：104.9 nM，HDAC3：73.6 nM；HDAC4：271.3 nM)。在 HCT116 细胞中，该化合物表现出强效的抗增殖活性 (GI 50 值为 3.1 μM），而在其他癌细胞系如 MDA-MB-231 (GI 50 值为 22.3 μM）和 HCC827 (GI 50 值为 15.9 μM）则展示出较弱的抑制作用。此外，HDAC6-IN-66 (0.5-10 μM, 24 h) 可诱导 HCT116 和 MDA-MB-231 细胞中的 α-微管蛋白乙酰化。