G9a-IN-4 (Compound 31) 是一种专门针对 G9a/GLP 的抑制剂 (IC50 = 0.2 nM；IC50 = 0.43 nM)，并在 AlphaLISA 测试中对其他表观遗传靶点表现出高度选择性。G9a-IN-4 对于所有测试的癌细胞展现出强效抑制，包括血液肿瘤细胞：RPMI8226 (IC50 = 0.85 μM)、MV-4-11 (IC50 = 0.49 μM)、Jeko-1 (IC50 = 0.7 μM)、Molt4 (IC50 = 1.34 μM) 和实体瘤细胞：HeLa (IC50 = 1.55 μM)、U2OS (IC50 = 3 μM)、CT26 (IC50 = 3.31 μM)。G9a-IN-4 在 1.25-2.5 μM 下，作用72小时，以剂量依赖的方式显著降低 CT26 细胞中 H3K9 的二甲基化水平。在 2.5-5 μM 范围内，作用 48 小时，显著诱导 CT26 细胞中活性氧 (ROS) 的积累。用 2.5-10 μM 处理 12 小时，浓度达到 10 μM 时显著降低 LC3-I 的表达，并在所有测试浓度下提高 LC3-II 水平，从而以剂量依赖的方式增加 LC3-II 与 LC3-I 的比值，有效诱导 CT26 细胞自噬。G9a-IN-4 在 2.5-10 μM 范围内处理 24 小时，可将 CT26 细胞凋亡比例从 5.48% 提高到 91.37%。同时，在 2.5-5 μM 作用下的 24 小时内，G9a-IN-4 能诱导 CT26 细胞发生 G0/G1 期阻滞。

G9a-IN-4 (10 mg/kg，腹腔注射，每两天一次，持续两周) 在结肠癌小鼠模型中能显著抑制肿瘤生长，同时不引起显著的体重减轻或死亡。