FITC (Fluorescein 5-isothiocyanate) is a derivative of fluorescein for the labeling of amines.

Annexin V-FITC/PI 用于检测软骨细胞凋亡[1]。PEI修饰的CDs与荧光素异硫氰酸酯 (FITC) 结合，以制备CDs-FITC复合物[2]。

一、 胺标记
1. 结合： 将 FITC 稀释于适当的溶剂（通常为二甲基亚硫酰胺 DMSO），与目标生物分子溶液混合。通常在微碱性条件下（pH 8.0-9.0）进行反应，以确保 FITC 的有效结合。
2. 孵育： 将混合物在室温或 4°C 下孵育 1-2 小时。由于 FITC 对光敏感，因此需要避光处理。
3. 纯化： 反应完成后，通过透析、凝胶过滤等纯化技术去除多余的 FITC，得到标记的生物分子。
二、细胞成像
1. 细胞染色： 将 FITC 标记的抗体或蛋白质应用于细胞或组织，并孵育一定时间（通常为 30 分钟至 1 小时），温度为室温或 4°C。
2. 荧光显微镜： 洗去未结合的抗体后，使用荧光显微镜观察细胞或组织。FITC 可在约 495 nm 波长激发，并在 519 nm 波长发射。
三、pH 和 Cu2+ 敏感性
1. pH 敏感性： 将 FITC 标记的分子置于不同 pH 值的溶液中，荧光强度将随 pH 的变化而变化，可以定量测量。
2. Cu2+ 检测： FITC 的荧光还会受到 Cu2+ 的影响，因此可以用于测定样品中 Cu2+ 的浓度，通过观察荧光强度的变化进行检测。