CY7 (Sulfo-Cyanine7) is a fluorescence labeling agent (Ex=750 nm, Em=773 nm). Cy7 is used for labeling oligonucleotides, antibodies, peptides, and proteins.

使用方法
一、试剂准备
1.母液配置：需要使用适当的溶剂（如 DMSO 或水）来溶解，具体浓度根据实验要求来决定，通常溶解浓度为 0.1–1 mg/mL；如果是用于标记分子，可以根据需要通过溶剂调整试剂的浓度。
二、操作步骤
1. 标记过程：
1） 蛋白质或抗体标记：
将 CY7 染料与目标分子（如抗体或蛋白质）混合。在 4°C 下孵育 1–2 小时，确保染料与分子结合。通常使用硫酸化 CY7（Sulfo-Cyanine7）来增强染料的溶解性和结合稳定性。
注意事项：可以通过离心去除未结合的染料，确保标记的分子纯净。
2）肽和寡聚核苷酸标记：对于肽或寡核苷酸，标记过程与蛋白质或抗体类似，但标记反应通常较为迅速，可以在更短的时间内完成（约 30 分钟至 1 小时）。
2. 反应条件：
1）在标记过程中，通常使用磷酸盐缓冲液（PBS）或其他生理缓冲液，确保pH值适合分子与染料的结合。
2）如果需要，可以使用浓度较高的CY7（如10–50 μM），以保证有效的标记。
3. 清除未反应的染料：反应完成后，使用透析、凝胶过滤、或超滤等方法去除未结合的染料，减少背景噪音。
5. 荧光测定：对标记的分子进行荧光检测，使用激发波长750 nm，发射波长773 nm进行分析。可以使用荧光显微镜、流式细胞仪或近红外成像系统进行检测。
注意事项：在这些设备上，CY7 具有较强的荧光信号，适合在深层组织成像、动物模型及细胞研究中使用。
6. 数据分析：
1）根据荧光强度变化进行分析，判断标记分子的位置、浓度和分布。
2）可以进一步使用标准曲线或对比实验组与对照组进行数据处理。
注意事项：
1.溶解性： CY7 染料的溶解性较好，但在使用时应避免染料与非特定分子结合。
2.稳定性： CY7 荧光染料对光的敏感性较强，因此在实验中要避免强光照射以防止信号的光漂白。
3.反应时间： 标记时间过长可能导致非特异性结合，而时间过短可能导致标记不完全。因此，应根据具体的实验要求优化标记时间。
4.标记效率： 如果标记效率较低，可以调整染料的浓度或使用更长时间的孵育，以提高标记效果。