Collagenase Type IV is an endopeptidic matrix metalloproteinase MMP-18 derived from the bacterium Clostridium histolyticum that primarily degrades collagen type IV and VII and is commonly used to break down basement membranes (e.g., neural tissue, renal tissue) because of its mild activity.

Collagenase Type IV（0.5–2.5 g/mL）在体外细胞实验中主要用于从胰腺组织中分离胰岛细胞[1]。此外，它还能够降解基底膜中的IV型胶原蛋白，促进肿瘤细胞的侵袭和转移[2
使用方法
1. 储存液制备
向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1 g/mL（即1000×）的储存液。 使用低蛋白结合性的0.22 µm滤膜过滤除菌，分装成小份量，并在-20°C避光冻存。
2. 组织分离
(1)将组织切成3-4 mm大小的组织块，用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS溶液洗涤数次。
(2)加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS使其完全浸没组织块，并加入胶原酶至所需的工作浓度。
(3)在37°C下孵育4-18小时，消化过程中可使用水平摇床，并可加入3 mM的CaCl₂以提高消化效率。
(4)当细胞分散后，可使用不锈钢或尼龙网筛网筛选收集已分散的细胞，备用。
3. 器官灌注
(1)向37°C预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，并额外添加3 mM的CaCl₂以提高分离效率。
(2)根据已优化的速率对相应的器官进行胶原酶工作液的灌注。
(3)将回收的灌注液通过不锈钢或尼龙网筛过滤，分离已解离的细胞或小片段组织块与较大的团块。
(4)使用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次。
(5)将细胞重悬于细胞培养液中，并利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

在小鼠肿瘤模型中，局部注射Collagenase Type IV（剂量为10-50mg/kg）可降解肿瘤基质中的IV型胶原蛋白，显著提高药物的渗透性并减少肿瘤体积。当与化疗药物联合使用时，能够显著增强治疗效果。此外，采用10mg/kg剂量局部注射Collagenase Type IV预处理肿瘤组织后进行基因电转移，可显著提高基因载体的转染效率，进而增强基因治疗的效果[3]。