Collagenase Type III, an endopeptide matrix metalloproteinase MMP-13 derived from the bacterium Clostridium histolyticum, preferentially degrades type III collagen and is commonly used in sensitive tissues such as breast, tumor, and uterus due to its mild activity.

Collagenase Type III溶解于缓冲液（常用浓度为0.1%-1mg/mL），与组织样本在37°C孵育1-2小时后，通过离心洗涤获得细胞。该方法常用于从乳腺组织中制备原代细胞[1]。
实验步骤: 1.储存液配制
（1）准确称取100mg胶原酶，缓慢加入含有Ca²⁺、Mg²⁺的1mL Hank平衡盐溶液（HBSS）中，随后通过振荡促进其充分溶解，成功制备出浓度为100mg/mL（即100×）的储存液。
（2）使用0.22μm滤膜过滤除菌，立即使用或分装成小份量，在-20°C至-5°C的低温环境下避光冷冻保存，以确保溶液的质量和活性不受影响。
（3）需要根据特定的实验条件或参考文献资料确定所需浓度。用于组织和细胞分散的常用浓度为0.5-2.5mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2mg/mL。
2.实验方法
（1）将目标组织（如乳腺组织、结肠癌干细胞等）清洗干净，去除多余杂质。
（2）根据实验需求，将Collagenase Type III溶解于适当的缓冲液中，通常浓度为1-2mg/mL。
（3）将组织样本置于酶溶液中，通常在37°C下孵育1-2小时，具体时间根据组织类型和实验需求调整。
（4）加入适量的终止液（如含血清的培养基）以停止酶的活性。
（5）通过离心或过滤等方法分离出所需的细胞。