细菌去糖醛酸化活性测定实验
一、制备细菌裂解液。
二、操作步骤
1.用反应缓冲液（含 1 倍蛋白酶抑制剂）稀释细菌裂解液，转移到透明的96孔板中，在 37℃ 下以 250 rpm 振荡预孵育 10 分钟；
2.最终反应条件为 1 μg 细菌分离裂解蛋白，反应缓冲液中加入 200 μM 4-MUG，终体积为 100 μL；
3.37℃ 下 250 rpm 孵育 24 小时；
4.在特定时间点用荧光测量测定 4-MU 的形成，激发波长为 330 nm，发射波长为 450 nm。