方法： 使用人骨肉瘤 U2OS 细胞，瞬时转染 ERα 或 ERβ 表达质粒 (pSG5-ERα/pSG5-ERβ)、报告质粒 p(ERE)2-luc+ 和标准化质粒 pRenilla-CMV，以不同浓度的 (E)-4-Hydroxytamoxifen 处理细胞，通过双荧光素酶报告基因检测方法，评估其对 E2 诱导的转录激活的抑制作用。
结果： (E)-4-Hydroxytamoxifen 有效抑制 ERα 和 ERβ 的转录激活，IC₅₀值分别为 2.28 nM 和 0.99 nM ^[1]。
方法： 使用 MCF-7 乳腺癌细胞，以1 μM 的 (E)-4-Hydroxytamoxifen 处理 24 h，通过 Western Blot 方法检测 ERα 蛋白表达水平，并以 β-actin 作为上样对照。
结果： 与溶剂对照(DMSO)相比，(E)-4-Hydroxytamoxifen 处理显著上调 MCF-7 细胞中 ERα 蛋白水平^[1]。
方法： 使用 MCF-7 乳腺癌细胞，以不同浓度(最高20 μM)的 (E)-4-Hydroxytamoxifen 处理72 h，通过结晶紫染色法测定细胞生物量，评估其抗增殖活性。
结果： (E)-4-Hydroxytamoxifen 呈浓度依赖性抑制MCF-7细胞生长，IC₅₀ 值为 4.94 μM^[1]。
方法： 使用人乳腺癌 MCF-7 细胞（ER 阳性），在无酚红、含5%经 DCC 处理胎牛血清的培养基中培养，以 0.1 nM 雌二醇（E₂）刺激细胞生长，同时加入不同浓度（10 pM ~ 1 μM）的 (E)-4-Hydroxytamoxifen 处理8天，通过测定 DNA 含量评估其对 E₂ 促进的细胞增殖的拮抗作用。
结果： (E)-4-Hydroxytamoxifen呈浓度依赖性地抑制E₂诱导的MCF-7细胞增殖，在1 μM浓度下几乎完全拮抗E₂的促增殖效应，该效应可被100 nM E₂逆转^[2]。

方法： 雌性 BALB/c 裸鼠皮下接种 MCF-7 细胞建立乳腺癌异种移植瘤模型，待肿瘤平均体积达100 mm³后，随机分为4组（n=8），其中一组通过腹腔注射给予 (E)-4-Hydroxytamoxifen（3 mg/kg），每2天给药一次，共给药6次（12天），另设溶剂对照组（DMSO）。每2天测量肿瘤体积和小鼠体重，第15天处死小鼠，剥离肿瘤称重，计算肿瘤生长抑制率；肿瘤组织进行 HE 染色、Ki67 免疫组化染色和 TUNEL 凋亡检测。
结果： (E)-4-Hydroxytamoxifen 单药（3 mg/kg）能够有效抑制裸鼠体内 MCF-7 移植瘤的生长，肿瘤生长抑制率为 45.44%，肿瘤体积和肿瘤重量均显著小于对照组；(E)-4-Hydroxytamoxifen 对小鼠体重无明显影响；免疫组化显示 (E)-4-Hydroxytamoxifen 降低肿瘤组织中 Ki67 阳性细胞数；HE染色显示 4-OHT 诱导肿瘤组织细胞损伤；TUNEL 染色显示 4-OHT 诱导肿瘤组织细胞凋亡^[3]。