Name: Sucrose Synthase(SS-II) Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0251M
Rating: 5 (4 reviews)

规格

价格

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100 T

¥ 1,382

4-6日内发货

产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0251M-ES	100mL×1瓶	4℃保存；
CB0251M-A	2.5mL×1瓶	-20℃保存；
CB0251M-C	2mL×1瓶	4℃保存；
CB0251M-D	25mL×1瓶	4℃保存；
CB0251M-E	6mL×1瓶	4℃避光保存；
CB0251M-Standard	粉剂×1支	临用前加 1 mL 水，配制成 100 mg/mL 蔗糖溶液；4℃保存。

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰。

二、样本的前处理：
1.按照组织质量（g）：CB0251M-ES体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL CB0251M-ES），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。
2.标准液的稀释：将蔗糖标准液用蒸馏水稀释为 10、7、5、3、2、1、0.5 mg/mL 的标准溶液。
3.样本测定，（在EP管中依次加入下列试剂）：

试剂名称	测定管（μL）	对照管（μL）	标准管（μL）	空白管（μL）
样本	10	10
蒸馏水		45	45	55
标准溶液			10
CB0251M-A	45
混匀，25℃准确水浴10min
CB0251M-C	15	15	15	15
沸水浴中煮沸10min左右（盖紧，以防止水分散失），冷却
CB0251M-D	210	210	210	210
CB0251M-E	60	60	60	60
混匀，沸水浴30min，冷却后，取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中，480nm下测定各管吸光值，分别记为 A对照、A测定、A标准和 A空白，计算 ΔA测定=A测定-A对照，ΔA标准=A标准-A空白。每个测定管需设一个对照管。标准曲线和空白管只需测 1-2 次

四、SS-Ⅱ活性计算：
1.标准曲线的绘制：
以标准液的浓度(mg/mL)为 x 轴，对应的 ΔA标准为 y 轴绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将 ΔA测定代入方程中计算得到样本浓度(x，mg/mL)。
2.α-淀粉酶活性的计算：
(1)按照蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性 (μg/min/mg prot) = [1000×x×V1]÷(V1×Cpr)÷T = 100x÷Cpr
(2)按照样本鲜重计算
单位定义：每g组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性 (μg/min/g鲜重) = [1000×x×V1]÷(W×V1÷V2)÷T = 100x÷W
注：1000：1mg/mL=1000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液(CB0251M-ES)体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；T ：反应时间：10min。

注意事项

1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。