Name: Sucrose Phosphoric Acid Synthetase Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0171M
Rating: 5 (4 reviews)

规格

价格

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数量

100 T

¥ 1,372

10-12日内发货

产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0171M-ES	100mL×1 瓶	4℃保存；
CB0171M-A	2.5mL×1 瓶	-20℃保存；
CB0171M-B	10mL×1 瓶	4℃保存；
CB0171M-C	2mL×1 瓶	4℃保存；
CB0171M-D	25mL×1 瓶	4℃保存；
CB0171M-E	6mL×1 瓶	4℃保存；

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰。

二、粗酶提取：
按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL CB0171M-ES），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 480nm，蒸馏水调零。
2.在EP管中依次加入下列试剂：

试剂名称	测定管（µL）	对照管（µL）	标准管（µL）	空白管（µL）
上清	10	10
蒸馏水		45	45	55
CB0171M-B			10
CB0171M-A	45
混匀，25℃准确水浴 10min
CB0171M-C	15	15	15	15
沸水浴中煮沸 10min 左右（盖紧，以防止水分散失），冷却
CB0171M-D	210	210	210	210
CB0171M-E	60	60	60	60
混匀，沸水浴 30min，冷却后，取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中，480nm 下测定各管吸光值。

注意：标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。

四、SPS 活力单位的计算：
(1)按照蛋白浓度计算
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS 活性 (μg /min/mg prot) = {C 标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)} ÷(V1×Cpr)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

(2)按照样本鲜重计算
单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS 活性 (μg /min /g 鲜重) = {C 标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)} ÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
注： C 标准管：标准管浓度，1000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；T：反应时间：10min。

注意事项

1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。