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Solid FDA hydrolase Assay Kit (Microanalysis)

Solid FDA hydrolase Assay Kit (Microanalysis)

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Solid FDA hydrolase Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0074M
别名 土壤荧光素二乙酸酯水解酶活性检测试剂盒(微量法)
土壤荧光素二乙酸酯(Soil-Fluorescein diacetate,S-FDA)水解反应能很好的反应土壤中微生物活性和土壤质量的变化以及生态系统中有机质的转化,是土壤质量研究中的重要生物学指标之一。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,296
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

FDA是一种无色化合物,在介质中能被许多土壤酶所催化水解,并经脱水反应,产生酶解终产物荧光素,稳定不易被分解,并在490nm处有强吸收峰,通过检测490nm处的吸光值变化可计算得FDA水解酶活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0074M-A 25mL×1瓶 4℃保存;
CB0074M-B 粉剂1瓶 -20℃避光保存,临用前加2mL CB0074M-C溶解。
CB0074M-C 丙酮(自备) 常温保存;
CB0074M-Standard 1mL×1支 4℃保存;

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、天平、低温离心机、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅、丙酮。

二、样本处理:
称取风干过30-50目筛土壤约0.1g,备用。

三、测定步骤:
1.分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至490nm,蒸馏水调零。
2.样本测定(在EP 管中依次加入下列试剂):

空白管 标准管 对照管 测定管
样本(g) 0.05 g 0.05 g
标准液(μL) 40
双蒸水(μL) 40
CB0074M-A(μL) 200 200 240 200
CB0074M-B(μL) 40
充分混匀,30℃,震荡1h
CB0074M-C(μL) 160 160 160 160
10000g,常温离心5min,取200μL上清于微量石英比色皿/96孔板中测定490nm处吸光值A,计算ΔA1=A标准管-A空白管,ΔA2=A测定管-A对照管
注意:空白管和标准管只需测定1-2次。

四、酶活性计算公式:
酶活性定义:每克土壤每天产生1μmol荧光素的量为一个酶活力单位。
FDA活性 (μmol/d/g) = (ΔA2÷ΔA1×C标准品)×V反总÷W = 0.04×(ΔA2÷ΔA1)÷W
注:C标准品:标准品浓度100μmol/L;V反总:反应总体积,0.4mL;W:样本质量,g

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.尽量采用新鲜土样或者短期低温保存样品,否则很难准确反映酶的活性。
2.测定之前进行预实验,若吸光值较高,请进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。