土壤硝酸还原酶 (S-NR) 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO₃ˉ + NADH + H⁺→ NO₂ˉ + NAD⁺ + H₂O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰，可用分光光度法测定。

50T/24S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

二、测定步骤：
1.分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
2.打开水浴锅，调节温度到 37℃。
3.在 EP 管中依次加入下列试剂：

2.将培养结束的上清液稀释 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸馏水），若吸光值仍大于
1继续稀释。
3.标准品的准备：吸取适量的标准溶液，用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/mL。
4.测氨量，分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 630nm。在微量玻璃比色皿或96孔板中加入下列试剂：

三、S-NR 活性计算：
单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μmol NO₂ 的量为一个 S-NR 活力单位。
S-NR活性 (μmol/d/g) = C 标准×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总÷W÷T = 12×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)
注： C 标准管：标准管浓度，0.1μmol/mL；V反总：反应体系总体积，0.5mL；T：反应时间，1h=1/24d； W：样本质量，0.1g。

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。