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Soil acid phosphatase Assay Kit (Microanalysis)

Soil acid phosphatase Assay Kit (Microanalysis)

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Soil acid phosphatase Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0153M
别名 土壤酸性磷酸酶(S-ACP)活性检测试剂盒(微量法)
土壤酸性磷酸酶(Soil acid phosphatase, S-ACP)是一类催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影响,根据最适 pH 范围,通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
规格价格库存数量
100 T
¥ 616
6-8日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

酸性环境中,S-ACP 催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出 S-ACP 活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/96S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0153M-A 40 mL×1 瓶 4℃避光保存
CB0153M-B 粉剂×1 瓶 4℃保存,用前加 100mL 蒸馏水充分溶解
CB0153M-C 10 mL×1 瓶 4℃保存
CB0153M-D 粉剂×1 瓶 4℃避光保存。临用前加 576 μL 无水乙醇(自备),24 μL 蒸馏水充分溶解(变褐色后不能再使用)
CB0153M-Standard (0.5μmol/mL) 1 mL×1支 4℃保存

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、30-50目筛、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。

二、粗酶液提取:
1.新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。
2.称取风干混匀土壤约 0.1g,加入 50μL 甲苯(自备),轻摇 15min;加 0.4 mL CB0153M-A并且摇匀后,置于 37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应 24h;到时后迅速加入 1mL CB0153M-B充分混匀,以终止酶催化的反应。8000g,25℃离心 10min,取上清液置于冰上待测。

三、测定步骤:
1.分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 660 nm,分光光度计用蒸馏水调零。
2.在 EP 管中依次加入下列试剂:

试剂名称 空白管(µL) 标准管(µL) 测定管(µL)
蒸馏水 10
标准液 10
上清液 10
CB0153M-C 20 20 20
CB0153M-D 4 4 4
充分混匀,显色后再加蒸馏水
蒸馏水 166 166 166
混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A空白管、A标准管、A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定1-2次。

四、S-ACP 活性计算公式:
活性单位定义:37℃中每克土壤每天释放 1nmol 酚为 1 个酶活单位。
S-ACP (U/g) = [C 标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总×1000÷W÷T = 725×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
注:C 标准液:0.5 μmol/mL;V 总:催化体系总体积,1.45mL;W:土壤样品质量,g;T:催化反应时间,24h=1 d,1000:单位换算系数,1μmol=1000nmol。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。