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SBE Assay Kit (Microanalysis)

SBE Assay Kit (Microanalysis)

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SBE Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0244M
别名 淀粉分支酶活性检测试剂盒(微量法)
淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,728
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

直链淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE使直链淀粉含量减少,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件: 

编号 规格 储存条件
CB0244M-ES 100mL×1瓶 4℃保存;
CB0244M-A 10mL×1瓶 4℃保存;
CB0244M-B 粉剂×2支 4℃保存;临用前每支加入1mL蒸馏水,95℃沸水浴充分溶解后备用;剩余试剂4℃保存,四周之内有效;
CB0244M-C 13mL×1瓶 4℃保存;
CB0244M-D 1mL×1瓶 4℃保存;

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。

二、粗酶液提取:
按照组织质量(g):CB0244M-ES体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL CB0244M-ES),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

三、测定步骤:
1.分光光度计或酶标仪预热30 min以上,调节波长到660nm,蒸馏水调零。
2.样本测定(在EP管中加入下列试剂):

试剂名称 对照管(μL) 测定管(μL)
95℃水浴1min后灭活的粗酶液 65
粗酶液 65
CB0244M-A 85 85
CB0244M-B 10 10
混匀,37℃准确保温20 min,95℃水浴5min(盖紧防止水分散失),冷却
CB0244M-C 130 130
CB0244M-D 10 10
混匀,室温静置10min,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,660nm处读取各管吸光值。每个测定管需设个一个对照管。

注意:
1.可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。
2.CB0244M-B如有沉淀,务必沸水浴溶解后使用。

四、SBE活力单位的计算
1.按照蛋白浓度计算
单位定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性 (U/mg prot) = ( A对照管-A测定管)/A对照管÷Cpr ×100
2.按照样本鲜重计算
单位定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性 (U/g 鲜重) = (A对照管-A测定管)/A对照管÷(W÷V样总)×100
注:
V样总:提取液总体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.蛋白定量测定,建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。