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S-NiR Assay Kit (Spectrophotometry)

S-NiR Assay Kit (Spectrophotometry)

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S-NiR Assay Kit (Spectrophotometry)
产品编号 CB0267S
别名 土壤亚硝酸还原酶活性检测试剂盒(分光光度法)
土壤亚硝酸还原酶(Solid-Nitrite reductase,S-NiR)是反硝化作用中的关键酶之一,参与亚硝酸盐至NO的还原反应,它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率,为氮素转化规律的研究提供一定的依据。
规格价格库存数量
50 T
¥ 924
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

亚硝酸还原酶可将 NO2- 还原为NO,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO2-减少,即540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

50T/24S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0267S-A 10mL×1瓶 4℃保存;
CB0267S-B 粉剂×1瓶 4℃保存;临用前加10mL蒸馏水溶解。
CB0267S-C 10mL×1瓶 4℃保存。(如出现沉淀可以70-80℃加热溶解)
CB0267S-D 25mL×1瓶 4℃避光保存;(如出现沉淀可以70-80℃加热溶解)
CB0267S-E 25mL×1瓶 4℃避光保存;
工作液配制 临用前根据用量将 CB0267S-D 和 CB0267S-E 以1:1的比例混合。

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、水浴锅、低温离心机、天平。

二、样本处理
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

三、测定步骤:
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2.样本测定,(在EP 管中依次加入下列试剂):

空白管 对照管 测定管
风干土样(g) 0.1 0.1
蒸馏水(μL) 200
CB0267S- A(μL) 200 200
CB0267S- B(μL) 200 200 200
混匀后,25℃反应1h
CB0267S-C(μL) 200 200 200
充分震荡30S,10000rpm,4℃,离心10min
上清液(μL) 500 500 500
工作液(μL) 1000 1000 1000
充分混匀,用蒸馏水调零,静置3min后测定540nm处各管吸光值,分别记为A空白管、A对照管、A测定管。

四、计算公式:
1.标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x 轴(x,μmol/mL),标准溶液对应的 ΔA标准为 y 轴(y,ΔA标准),建立标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将 ΔA测定带入方程得到 x (μmol/mL)。
2.酶活计算
酶活单位定义:每g土样每天还原1μmol NO2ˉ 的量为一个酶活力单位。
S-NiR (μmol/d/g土样) = x×V标÷W÷T = 0.96x÷W
注:T:反应时间,1h=1/24d;V标:标准液体积,0.04mL;W:样本质量,g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.配制好的工作液3天内使用完。
2.若吸光值超过1.5,将上清液进行适当的稀释后再加入工作液显色,并在计算公式中乘以稀释倍数。
3.严格控制显色时间,否则会对结果有影响。
4.标准曲线线性范围为0.03 μmol/mL-1.5 μmol/mL。
5.A空白管-(A测定管-A对照管)线性范围为0.02-3。
6.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。