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常见问题解答
S-NAG Assay Kit (Visible Spectrophotometry)
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产品编号 CB0258V
别名 土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶检测试剂盒（可见分光光度法）
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG）是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与某些土壤微生物机理状态密切相关。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50 T | ¥ 946 | 4-6日内发货 |
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检测原理
S-NAG 分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm 有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG 活性。
产品规格
50T/24S规格的产品组成及保存条件：
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0258V-A | 甲苯5mL | 4℃保存 （自备） |
| CB0258V-B | 粉剂×2瓶 | -20℃保存；临用前加入6mL蒸馏水，充分溶解备用；剩余试剂-20℃分装保存4周 |
| CB0258V-C | 25mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0258V-D | 50mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0258V-Standard | 1ml×1支（5 mmol/L） | 4℃保存 |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
操作说明
一、自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
二、粗酶液提取：
新鲜土样自然风干或37 度烘箱风干，过30~50 目筛。
三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2.标准品制备：临用前取100 μL标准液，加入到400 μL试剂C中，得到1 mmol/L标准液（1000 μmol/L），再用蒸馏水稀释到待用标准液浓度100 μmol/L。
3.加样表：
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
|---|---|---|---|---|
| 风干土样（g） | 0.05 | 0.05 | ||
| CB0258V-A（μL） | 25 | 25 | ||
| 室温振荡混匀15min | 90℃振荡混匀15min | |||
| 蒸馏水（μL） | 400 | |||
| CB0258V-B（μL） | 400 | |||
| CB0258V-C（μL） | 500 | 500 | ||
| 混匀， 37℃振荡反应1h 后，90℃水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却，10000g 25℃离心10min，取上清液 | ||||
| 上清液（μL） | 500 | 500 | ||
| 标准品（μL） | 500 | |||
| 蒸馏水（μL） | 500 | |||
| CB0258V-D（μL） | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
| 室温静置2min后，10000g 常温离心5min，取上清测定400nm处的吸光值A。分别记为 A对照管，A测定管，A标准管，A空白管。计算 ΔA=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管（标准管只需检测 1-2 次）。 | ||||
四、S-NAG活性计算：
单位的定义：每天每g 土样中产生1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力 (U/g 土样) = ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=44.4×ΔA测定÷ΔA标准
注：C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：9.25×10-4 L；W：样本质量，0.05g。
注意事项
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
引用文献
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