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S-NAG Assay Kit (Microanalysis)

S-NAG Assay Kit (Microanalysis)

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S-NAG Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0258M
别名 土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶检测试剂盒(微量法)
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG)是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与某些土壤微生物机理状态密切相关。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,555
4-6日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

S-NAG 分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG 活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0258M-A 甲苯 4℃保存(自备)
CB0258M-B 粉剂×1瓶 -20℃保存;临用前加入5mL蒸馏水,充分溶解备用;剩余试剂-20℃分装保存4周;
CB0258M-C 10mL×1瓶 4℃保存
CB0258M-D 8mL×1瓶 4℃保存
CB0258M-Standard 1mL×1 支 4℃保存

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

二、粗酶液提取:
新鲜土样自然风干或37 度烘箱风干,过30~50 目筛。

三、测定步骤:
1.酶标仪或分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2.标准品制备:临用前取100 μL标准液,加入到400 μL试剂C中,得到1 mmol/L标准液(即1000 μmol/L),再用蒸馏水稀释到待用标准液浓度100 μmol/L。
3.加样表:

试剂名称 测定管(μL) 对照管(μL) 标准管(μL) 空白管(μL)
风干土样(g) 0.02g 0.02g
CB0258M-A 10 10
室温振荡混匀15min 90℃振荡混匀15min
蒸馏水 130
CB0258M-B 130
CB0258M-C 160 160
混匀, 37℃振荡反应1h 后,90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP 管或96 孔板中加入下列试剂:)
上清液 70 70
标准溶液 70
蒸馏水 70
CB0258M-D(μL) 130 130 130 130
充分混匀,室温静置2min 后,400nm 处测定吸光值A,分别记为 A对照管,A测定管,A标准管,A空白管。计算 ΔA=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管(标准管只需检测1-2 次)

四、NAG活性计算:
单位的定义:每天每g 土样中产生1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力 (U/g 土样) =ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=36×ΔA÷ΔA标准
注:C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:3×10-4L;W:样本质量,0.02g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。