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| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 1,728 | 10-12日内发货 |
S-LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
100T/48S规格的产品组成及保存条件:
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0259M-A | 35mL×1瓶 | 4℃保存; |
| CB0259M-B | 粉剂×1瓶 | -20℃保存; |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿和蒸馏水。
二、粗酶液提取:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
三、测定步骤:
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。
2.在CB0259M-B瓶中加入15mL CB0259M-A充分溶解(如较难溶解,可60℃水浴加热约30min促进溶解);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3.样本测定,(在EP 管中依次加入下列试剂):
| 试剂名称 | 测定管(μL) | 对照管(μL) |
|---|---|---|
| 新鲜土样(g) | 0.05g | 0.05g |
| CB0259M-A | 300 | |
| CB0259M-B | 300 | |
| 混匀, 37℃振荡反应1h后,8000g 4℃离心10min,取200μL上清液于微量石英比色皿或96孔板中,405nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 | ||
四、LAP活力计算:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位定义:每天每g土样每天生成1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP (μmol/d /g 土样) = ΔA×V反总÷(ε×d)×106÷W÷T = 14.8×ΔA
注:V反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d;W:样本质量,0.05g。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
单位定义:每天每g土样每天生成1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP (μmol/d /g 土样) = ΔA×V反总÷(ε×d)×106÷W÷T = 29.6×ΔA
注:V反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,0.5cm;T:反应时间,1h=1/24d;W:样本质量,0.05g。
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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