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S-LAP Assay Kit (Microanalysis)

S-LAP Assay Kit (Microanalysis)

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S-LAP Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0259M
别名 土壤亮氨酸氨基肽酶检测试剂盒(微量法)
土壤亮氨酸氨基肽酶(Solid-Leucine Aminopeptidase, S- LAP)是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,728
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

S-LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0259M-A 35mL×1瓶 4℃保存;
CB0259M-B 粉剂×1瓶 -20℃保存;

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿和蒸馏水。

二、粗酶液提取:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

三、测定步骤:
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。
2.在CB0259M-B瓶中加入15mL CB0259M-A充分溶解(如较难溶解,可60℃水浴加热约30min促进溶解);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3.样本测定,(在EP 管中依次加入下列试剂):

试剂名称 测定管(μL) 对照管(μL)
新鲜土样(g) 0.05g 0.05g
CB0259M-A 300
CB0259M-B 300
混匀, 37℃振荡反应1h后,8000g 4℃离心10min,取200μL上清液于微量石英比色皿或96孔板中,405nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

四、LAP活力计算:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位定义:每天每g土样每天生成1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP (μmol/d /g 土样) = ΔA×V反总÷(ε×d)×106÷W÷T = 14.8×ΔA
注:V反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d;W:样本质量,0.05g。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
单位定义:每天每g土样每天生成1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP (μmol/d /g 土样) = ΔA×V反总÷(ε×d)×106÷W÷T = 29.6×ΔA
注:V反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,0.5cm;T:反应时间,1h=1/24d;W:样本质量,0.05g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。