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S-C1 Assay Kit (Microanalysis)

S-C1 Assay Kit (Microanalysis)

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S-C1 Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0260M
别名 土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶活性检测试剂盒(微量法)
外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶(Circumcision-β-1,4-glucanase, C1)(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,512
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

采用3,5-二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件: 

编号 规格 储存条件
CB0260M-ES 100mL×1瓶 4℃保存;
CB0260M-A 6mL×1瓶 4℃保存;
CB0260M-B 25mL×1瓶 4℃保存;
CB0260M-Standard 粉剂×1支 临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解,配成 100 mg/mL 溶液备用;4℃保存

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

二、粗酶液提取:
称取约0.1g新鲜土样或风干土样,加入1mL CB0260M-ES,进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

三、测定步骤:
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2.将 100 mg/mL 标准液用蒸馏水稀释为 5、4、3、2、1.5、1mg/mL 的标准溶液备用。
3.样本测定,(在EP 管中依次加入下列试剂):

试剂名称 测定管(μL) 对照管(μL) 标准管(μL) 空白管(μL)
样本 10 10
CB0260M-A 100
蒸馏水 100 100 110
标准溶液 10
混匀,37℃准确水浴2h
CB0260M-B 200 200 200 200
混匀,90℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,测540nm下吸光值A,分别记 为 A对照管、A测定管、A标准管、A空白管。计算 ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管,标准曲线和空白管只需检测 1-2 次。

四、C1活力计算:
1.标准曲线的绘制:
根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测 定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。
2.S-C1活性的计算
单位定义:每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力 (μg/min/g鲜重) = [1000×x×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T = 91.67x÷W
注:1000:1mg/mL=1000μg/mL;V反总:反应体系总体积,0.11mL;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min;W:样本质量,g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。