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| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 1,382 | 10-12日内发货 |
植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
100T/48S规格的产品组成及保存条件:
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0273M-Buffer | 100mL×1瓶 | 4℃保存; |
| CB0273M-A | 粉剂×1瓶 | 4℃避光保存,临用前加缓冲液50mL配制,现用现配;剩余试剂4℃保存一个月; |
| CB0273M-B | 15mL×1瓶 | 4℃保存; |
| CB0273M-Chromogenic Agent | 粉剂×7瓶 | 4℃避光保存,临用前根据用量每瓶加0.4mL双蒸水溶解,再加1.6mL CB0273M-B 混匀; |
| CB0273M-Standard | 1ml×1支(10μmol/mL) | 4℃保存。 |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
分光光度计/酶标仪、96孔板、天平、低温离心机、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。
二、样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
三、测定步骤:
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至700nm,蒸馏水调零。
2.标准品:临用前将10μmol/mL标准液用蒸馏水稀释为2、1、0.5、0.25、0.125μmol/mL的标准溶液备用。
3.样本测定(在EP 管中依次加入下列试剂):
| 对照管 | 测定管 | 空白管 | 标准管 | |
|---|---|---|---|---|
| 土样(g) | 0.03 | 0.03 | ||
| 甲苯(μL) | 20 | 20 | ||
| 振荡混匀,室温放置15min | ||||
| 缓冲液(μL) | 500 | |||
| CB0273M-A(μL) | 500 | |||
| 混匀,37℃孵育24h,10000g,4℃离心5min,取上清 | ||||
| 上清(μL) | 100 | 100 | ||
| 蒸馏水(μL) | 100 | |||
| 标准溶液(μL) | 100 | |||
| 显色剂(μL) | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 混匀,静置15min,测定700nm处吸光值,分别记为 A测定管、 A对照管、A标准管、A空白管,计算ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。标准曲线和空白管只需测 1-2 次。 | ||||
四、酶活性计算公式:
1.标准曲线的绘制: 根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。
2.酶活测定:
酶活性定义:37℃下每 g 土壤每天在反应体系释放 1μmol 无机磷为 1 个酶活力单位。
植酸酶活性 (U/g 土样) =x×V反总÷W÷T = 17.33x
注:V反总:反应总体积,0.52mL;T:反应时间,24h=1d;W:样本质量,0.03g。
1.显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是5个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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