MAO Assay Kit (UV Spectrophotometry)

以苄胺为底物，在 MAO 作用下，生成苄醛，以环已烷提取，在 242nm 测定吸光度，可测算出酶的活力。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、水浴锅、可调式移液器、金属震荡仪、蒸馏水等。

二、粗酶液提取
1.组织：准确称取组织重量,按重量（g）：体积（mL）=1:9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，制成 10%的匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清待测。
2.血清：直接测定。

三、测定步骤：
1.紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至242nm，蒸馏水调零。
2.样本测定：在EP管中加入下列试剂：

注意：
1.X代表取样量。参考取样量：10%脑组织匀浆取 500L 为佳，血清取 200～300L。
2.比色皿在用双蒸水冲洗干净后，还必须用无水乙醇冲洗，晾干后，备用。
3.连续抽提是指在旋涡混匀器上持续混匀，不间断； 操作过程最好使用玻璃试管操作，有些耐有机试剂 腐蚀的离心管也可以；由于上清液为有机试剂易挥发,离心过后,需尽快完成比色。

四、MAO活性计算公式：
1.按蛋白含量计算
酶活定义：每毫克组织蛋白在 37℃，1 小时内产生 0.01 个光密度为一个活力单位(U)。
MAO活性(U/mg prot) = ΔA÷0.01÷(V样×Cpr)÷T
2.按照液体体积计算
酶活定义：每 1mL 血清（浆）在 37℃，1 小时内产生 0.01 个光密度为一个活力单位(U)。
DAO活性(U/mL) = ΔA÷0.01÷V样 T
注：V样：反应中样本体积；T：反应时间，3h；Cpr:组织匀浆蛋白浓度,mgprot/mL(prot 指蛋白)

1.加完试剂D后，因试剂量较多，抽提时最好用冰箱保鲜膜封口后，用拇指按住试管口置于旋涡混匀器上进行抽提。离心转速要在 3500 转/分以上，这样上清分层较好。
2.样品蛋白质含量需要另外测定。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。