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| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 1,078 | 10-12日内发货 |
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰,280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。
100T/96S规格的产品组成及保存条件:
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0280M-A | 35mL×1瓶 | 4℃保存; |
| CB0280M-B | 35mL×1瓶 | 4℃保存; |
| CB0280M-C | 自备 | 4℃保存;石油醚,约需要 35mL(石油醚沸程:30~60℃) |
| CB0280M-D | 34mL×1瓶 | 4℃保存; |
| CB0280M-E | 1.5mL×1支 | 4℃保存; |
| CB0280M-F | 35mL×1瓶 | 4℃保存; |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板(非聚苯乙烯材质)、可调式移 液枪、研钵、EP管、封口膜、冰乙酸、石油醚、30-50目筛和蒸馏水。
二、样品处理
样本 80℃烘干至恒重,研磨,过 30-50 目筛,称取约 3mg 于1.5mLEP 管中。
三、测定步骤:
1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至280nm,分光光度计用冰乙酸调零。
2.测定操作表:
乙酰化:
| 试剂名称 | 测定管(µL) | 空白管(µL) |
|---|---|---|
| 样本(mg) | 3 | |
| CB0280M-A | 300 | |
| 65℃水浴反应30min。8000g,常温离心5min;去上清,留沉淀; | ||
| CB0280M-B | 300 | |
| 涡旋震荡5min。8000g,常温离心5min;去上清,留沉淀; | ||
| CB0280M-C | 300 | |
| 涡旋震荡5min。8000g,常温离心5min;去上清,留沉淀; | ||
| CB0280M-D | 300 | 300 |
| CB0280M-E | 12 | 12 |
| 充分混匀(封口膜密封,防止水分散失)。于80℃水浴锅水浴40min,进行乙酰化。每隔10min震荡30s,然后自然冷却至常温。 | ||
| CB0280M-F | 300 | 300 |
| 充分混匀,于8000g,常温离心10min,取上清待测。 | ||
测定:
| 上清 | 12 | 12 |
|---|---|---|
| 冰乙酸 | 588 | 588 |
| 充分混匀,吸取200μL于微量石英比色皿或96孔UV板中,测定280nm下的吸光值A,记为A测定管、A空白管,计算ΔA=A测定管-A空白管。空白管只需测1-2次。 | ||
四、计算公式
1.按微量石英比色皿计算
木质素含量(mg/g)=ΔA÷ε÷d×V检测÷(V上清×W÷V乙酰化)=1.3105×ΔA÷W
木质素的百分含量(%)=木质素含量÷1000×100%
V乙酰化:乙酰化反应体积,0.612mL;ε:木质素消光系数,23.35mL/mg/cm;d:比色皿光径,1cm;V上清:上清液体积,0.012mL;V检测:检测体积,0.6mL;W:样本质量,g;1000:换算系数,1g=1000mg。
2.按96孔UV板进行计算:
将上述公式中的d-1cm修改为d-0.5cm(96孔板光径)进行计算即可。
1.CB0280M-D有毒性,请操作时做好防护措施,加热前必须用封口膜密封,以防气体溢出。
2.加热过程中有剧烈反应,震荡时轻摇,以免压力过大喷出造成人身伤害。
3.冰乙酸具有强刺激性,建议操作过程全部在通风橱子操作。
4.取上清加冰乙酸步骤根据自己样品乙酰化程度,冰乙酸的用量可调整,保证吸光值在0.1-0.8之间即可,并在公式中参与计算。
5.由于冰乙酸具有挥发性,建议用比色皿进行测定实验。实验混匀后必须立即测定。
6.CB0280M-E有腐蚀性,注意防护。
7.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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