Lignin Assay Kit (UV Spectrophotometry)

Name: Lignin Assay Kit (UV Spectrophotometry)
Brand: TargetMol
SKU: CB0280UV
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0280UV

别名 木质素含量检测试剂盒（紫外分光光度法）

木质素（Lignin）是构成植物细胞壁的成分之一，是由聚合的构成的一类物质，存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化。木质素主要位于纤维之间，起抗压作用。

规格	价格	库存	数量
50 T	¥ 748	10-12日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰，280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。

产品规格

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0280UV-A	30mL×1瓶	4℃保存；
CB0280UV-B	30mL×1瓶	4℃保存；
CB0280UV-C	自备	4℃保存；石油醚，约需要 30mL（石油醚沸程：30～60℃）
CB0280UV-D	30mL×1瓶	4℃保存；
CB0280UV-E	1.5mL×1支	4℃保存；
CB0280UV-F	30mL×1瓶	4℃保存；

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1ml石英比色皿、可调式移液枪、研钵、EP管、封口膜、冰乙酸、石油醚、30-50目筛和蒸馏水。

二、样品处理
样本 80℃烘干至恒重，研磨，过 30-50 目筛，称取约 5mg 于1.5mL EP管中。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min，调节波长至280nm，分光光度计用冰乙酸调零。
2.测定操作表：
乙酰化：

试剂名称	测定管（µL）	空白管（µL）
样本（mg）	5
CB0280UV-A	500
65℃水浴反应30min；8000g，常温离心5min；去上清，留沉淀；
CB0280UV-B	500
涡旋震荡5min；8000g，常温离心5min；去上清，留沉淀；
CB0280UV-C	500
涡旋震荡5min；8000g，常温离心5min；去上清，留沉淀；
CB0280UV-D	500	500
CB0280UV-E	20	20
充分混匀（封口膜密封，防止水分散失），于80℃水浴锅水浴40min，进行乙酰化。每隔10min震荡30s，然后自然冷却至常温。
CB0280UV-F	500	500
充分混匀，于8000g，常温离心10min，取上清待测。

测定：
注：由于冰乙酸易挥发，请混匀后立即测定！建议混匀一管测一管

上清	20	20
冰乙酸	980	980
充分混匀，吸取1ml于石英比色皿中，测定280nm下的吸光值A，记为A测定管、A空白管，计算ΔA=A测定管-A空白管，空白管只需测1-2次。

四、计算公式
1.按微量石英比色皿计算
木质素含量(mg/g)=ΔA÷ε÷d×V检测÷(V上清×W÷V乙酰化)=1.3105×ΔA÷W
木质素的百分含量(%)=木质素含量÷1000×100%
V乙酰化：乙酰化反应体积，0.612mL；ε：木质素消光系数，23.35mL/mg/cm；d：比色皿光径，1cm；V上清：上清液体积，0.012mL；V检测：检测体积，0.6mL；W：样本质量，g；1000：换算系数，1g=1000mg。
2.按96孔UV板进行计算：
将上述公式中的d-1cm修改为d-0.5cm(96孔板光径)进行计算即可。

注意事项

1.CB0280M-D有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。
2.加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人身伤害。
3.冰乙酸具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱子操作。
4.取上清加冰乙酸步骤根据自己样品乙酰化程度，冰乙酸的用量可调整，保证吸光值在0.1-0.8之间即可，并在公式中参与计算。
5.由于冰乙酸具有挥发性，建议用比色皿进行测定实验。实验混匀后必须立即测定。
6.CB0280M-E有腐蚀性，注意防护。
7.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
8.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。